利用人体“炎症-血栓网络”模型研究儿茶素的抗血栓作用机理

The proposed research is on the mechanism of catechins' antithrombotic effect using human inflammation-thrombosis cells system. Catechins are important functional ingredients in tea products which have a beneficial effect in different human diseases, like thrombosis and other cardiovascular diseases. In this research, catechins with different structures/configurations will be used to study their effect on human platelet aggregation induced in diverse pathway. .A combination of purified platelets, leukocytes and whole blood will be used as different cell models to study the interaction between inflammation and coagulation within the system of human blood. The research will include: (1) Effect of catechins on platelet activity in different pathways; (2) Effect of catechins on platelet induced cyclooxygenase and leukocyte mediated lipoxygenase; (3) Effect of catechins on the interplay of inflammation and thrombosis system. .We will discuss the antithrombotic effect of catechins with its macromolecular structure and configuration, and have a comprehensive study of its relationship with platelet activation and relative inflammatory factors. The results of this research will provide a theoretical basis for the use of catechins as natural antithrombotic drugs. It benefits to analysis the effect of catechins on inflammation related blood thrombosis on the level of different enzymes, providing a great significance to further pharmacological study on natural tea functional ingredients

茶叶中的天然功能性成分儿茶素与心脑血管健康关系紧密，研究其抗血栓作用机理具有积极意义。本项目以不同构型的茶叶儿茶素为研究对象，利用人体血液"炎症-血栓网络"模型，采用人体分离纯化血小板、白细胞以及全血，研究儿茶素抗血栓和调节炎症的作用机理。主要内容有：（1）儿茶素对不同途径引起的血小板活性变化的影响;（2）儿茶素对血小板和白细胞分别介导的环氧化酶、脂氧化酶作用的影响;（3）儿茶素在炎症-血栓网络中的作用。本项目拟在分子结构水平上讨论儿茶素的抗血栓作用，全面探讨儿茶素与血小板活化、炎症因子的作用关系。研究结果可以为利用儿茶素作为天然抗血栓药物提供理论依据，为酶学水平上分析儿茶素对炎症相关血栓网络的作用提供参考，对深入研究茶叶天然功能性成分的药用机理具有重要意义。

血栓性疾病已成为威胁人们健康的首要疾病，血小板的异常激活是此类疾病的病理基础，抗血小板药物成为了治疗相关血栓性疾病的主要手段。茶叶中的天然功能性成分儿茶素与心脑血管健康关系紧密，研究其抗血栓作用机理具有积极意义。.本项目在分子结构水平上讨论儿茶素的抗血栓作用，全面探讨儿茶素与血小板活化、炎症因子的作用关系。研究选取EGCG, C, EC, EGC, CG, ECG等不同构型儿茶素，比较研究不同单体对血小板功能影响的差异，并对其可能的作用机制进行了深入探索。.利用血小板激活剂ADP，凝血酶，胶原及U46619诱导血小板聚集，研究儿茶素对血小板的聚集活性的影响。结果表明：在0-150 μM的浓度范围内，EGC、CG、ECG和EGCG呈现浓度依赖性地抑制由ADP引起的血小板聚集，其中，EGCG抑制作用最强；在由凝血酶诱导的血小板聚集中，EGCG在50 μM时对血小板聚集产生抑制作用，其它没有表现出显著的抑制效果；在U46619引起的血小板聚集中，CG和EGCG都能在50 μM表现出对血小板的抑制作用，作用效果CG＞EGCG；对胶原诱导的血小板聚集的抑制效果：CG＞ECG＞EGCG。.在ADP信号通路上,EGC、CG、ECG和EGCG在100μM下都能够显著抑制血小板在纤维蛋白原上的铺展，抑制血小板从外到内的信号通路（Outside-in signaling）；流式细胞仪检测发现，EGCG能显著抑制P-选择素在血小板上的表达；ECG和EGCG能抑制PAC-1的表达，抑制作用EGCG＞ECG；EGC、CG、ECG和EGCG可以抑制Akt473/308、p38、Erk和PKC基质的部分蛋白的磷酸化；CG，ECG和EGCG可以抑制血小板cAMP的下降。..EGC，CG，ECG和EGCG都能够有效抑制环氧化酶通路上的前列腺素生成。茶叶多酚物质对于软骨细胞分解代谢因子MMP-3、ADAMTS-5的活性都具有抑制作用，并能够抑制白介素1β所诱导的P38-MAPK的磷酸化。.本项研究结果表明，含有没食子酰基的儿茶素(CG ，ECG ，EGCG)和不含没食子酸但是在B环含有三羟基的ECG都具有抗血小板聚集的功效，特异性结构可能在血栓－炎症体系中具有不同的机理特征。本研究为长期饮茶预防血栓性心血管疾病这一理论提供了的科学依据，对于开发应用于心血管健康领域的天然儿茶素药物，奠定了药理基础。