ω-3 PUFAs保护脓毒症肠粘膜屏障的分子机制研究

肠上皮细胞间紧密连接变化是导致肠粘膜屏障功能障碍的病理基础，同时也是影响重症病人预后的重要原因。特异营养素不但能够预防和纠正营养不良，同时能够起到维护肠屏障的作用。作为机体重要的宏营养素，脂肪在肠道内消化为脂肪酸后被细胞吸收利用。ω-3PUFAs 作为脂肪酸的一种，可保护肠上皮细胞间紧密连接，维护肠粘膜屏障，但具体机制不明。FABP是肠上皮细胞内表达的一种脂肪酸受体蛋白，可能参与脂肪酸介导炎症信号通路对细胞代谢和功能的保护。本研究运用激光共聚焦免疫荧光显微镜、Western blot、EMSA和琼脂糖电泳等方法观察ω-3PUFAs在肠上皮细胞内FABP作用下对紧密连接结构和功能的影响，FABP亚细胞分布以及FABP介导的PPARγ信号通路，证实ω-3 PUFAs保护肠上皮细胞紧密连接的机制。研究结果有助于进一步理解脓毒症肠损伤的机理，从而为脂肪酸调节肠粘膜屏障功能提供新的理论依据。

机体在严重感染、脓毒症及创伤或等应激状态下，有效血容量不足，循环血量重新分配。此时肠道作为内脏器官，其血流量首先减少以保证心脏、脑部等核心器官的血供，对缺血缺氧极敏感的肠粘膜细胞受到缺血再灌注的二次打击。因此肠道缺血再灌注损伤是临床常见并且十分重要的病理生理过程，可以导致肠粘膜屏障功能障碍的发生并加重其演变过程，进而导致肠道细菌易位甚至MODS的发生，影响临床病人的预后。鱼油富含n-3多不饱和脂肪酸（PUFAs），是目前临床常用的免疫营养物，可以调节炎症反应，改善预后，保护肠上皮细胞间紧密连接，维护肠粘膜屏障，但具体机制不明。肠型脂肪酸结合蛋白（I-FABP）是一种特异性表达于小肠细胞的胞浆蛋白质，可能参与脂肪酸介导炎症信号通路对细胞代谢和功能的保护。本研究运用激光共聚焦免疫荧光显微镜、Western blot、EMSA 和琼脂糖电泳等方法观察ω-3PUFAs 在肠上皮细胞内FABP 作用下对紧密连接结构和功能的影响，FABP 亚细胞分布以及FABP 介导的PPARγ信号通路，证实ω-3PUFAs 保护肠上皮细胞紧密连接的机制。研究结果有助于进一步理解脓毒症肠损伤的机理，从而为脂肪酸调节肠粘膜屏障功能提供新的理论依据。离体实验研究已证实其对肠粘膜屏障的紧密连接有保护作用。本课题在体研究了鱼油对缺血再灌注损伤下肠粘膜屏障的保护作用，并探索其可能的作用机制。