基于TRPV1-CGRP/CGRP-R信号通路探讨芎麻汤药效部位治疗肝阳上亢兼血瘀型偏头痛机理研究

Migraine is a common clinical chronic neurovascular disease, which have severe impact on human’s health. Our team have once discovered that the pharmacodynamics parts of Xiongma Decoction can regulate migraine via CGRP/CGRP-R signal pathway while TRPV1 can lead to the release of CGRP whose inhibitor can prevent and reverse central sensitization. Therefore, here we put forward that the pharmacodynamics parts of Xiongma Decoction may inhibit the release of CGRP through TRPV1-CGRP/CGRP-R signal pathway to treat migraine with liver-yang hyperactivity and blood stagnation. This research intends to establish trigeminal ganglion neuron occlusion model for studying the how pharmacodynamics parts of Xiongma Decoction act on TRPV1. Meanwhile, set up rat model with migraine in liver-yang hyperactivity and blood stagnation through Aconite Decoction combined with electrical stimulation of dura mater and electrical stimulation on the primary hypertension rat dura mater. We plan to explore the therapeutic effects about how pharmacodynamics parts of Xiongma Decoction treat migraine with liver-yang hyperactivity and blood stagnation based on TRPV1-CGRP/CGRP-R signal pathway via behavioristics (open field test, elevated plus maze), molecular biological technique (IHC, qPCR, Western Blot). This research aims at providing new research strategy for new Traditional Chinese Medicine new drugs and offer experimental evidence for clinical application.

偏头痛是一种临床常见的慢性神经血管性疾病，严重影响人类的健康生活。本课题组前期研究发现芎麻汤药效部位通过CGRP/CGRP-R信号通路调节治疗偏头痛。同时TRPV1又可引起CGRP的释放，其抑制剂可防止和逆转中枢致敏。在此基础提出芎麻汤药效部位可能通过抑制TRPV1-CGRP/CGRP-R信号通路中CGRP的释放治疗肝阳上亢兼血瘀型偏头痛。本研究拟通过建立三叉神经节神经元细胞阻断模型，研究芎麻汤药效部位对TRPV1的作用；同时采用附子汤结合电刺激硬脑膜法、电刺激自发性高血压大鼠硬脑膜建立方证对应的大鼠肝阳上亢兼血瘀型偏头痛模型，通过行为学（空场、高架十字迷宫）、分子生物学技术（免疫组化、qPCR、Western Blot）探讨芎麻汤药效部位通过TRPV1-CGRP/CGRP-R信号通路对肝阳上亢兼血瘀型偏头痛的治疗作用。为开发治疗偏头痛的中药新药提供新的研究策略，为其临床应用提供实验依据。

偏头痛是一种临床常见的慢性神经血管性疾病，严重影响人类的健康生活。本课题组前期研究发现芎麻汤药效部位通过调节CGRP/CGRP-R信号通路治疗偏头痛。同时文献研究发现TRPV1又可引起CGRP的释放，其抑制剂可防止和逆转中枢致敏。因此提出“芎麻汤药效部位可能通过抑制TRPV1-CGRP/CGRP-R信号通路中CGRP的释放治疗肝阳上亢兼瘀血型偏头痛”。本课题一方面通过应用TRPV1拮抗剂及芎麻汤不同提取物干预新生SD大鼠三叉神经节神经元，探讨芎麻汤药效部位对TRPV1阻断细胞模型的影响。另一方面采用电刺激SHR大鼠三叉神经节构建肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型，并以正天丸反证该病证结合模型的稳定性；通过复制病证结合模型大鼠，探讨芎麻汤提取物对肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型大鼠的作用。同时还采用灌胃SD大鼠附子汤4周结合电刺激三叉神经节构建肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型，探究芎麻汤药效部位对病证结合偏头痛大鼠的治疗机制。研究发现TRPV1为芎麻汤药效部位的作用靶点；在中医药理论指导下，通过病证结合方式采用“SD大鼠附子汤灌胃＋电刺激三叉神经节”“SHR大鼠＋电刺激三叉神经节”可建立稳定的肝阳上亢兼瘀血型偏头痛大鼠模型，同时通过方证对应证实了芎麻汤药效部位对肝阳上亢兼瘀血型偏头痛具有较好的作用，并发现芎麻汤药效部位通过影响大鼠TCC内TRPV1-CGRP/CGRP-R信号通路活性，调节脑组织CGRP、5-HT的释放及SP的表达，防治肝阳上亢兼瘀血型偏头痛。为偏头痛药物研究提供可供参考的病证结合大鼠模型，为芎麻汤的防治机制及芎麻汤的临床应用提供实验依据。