基于药效团融合的新型抗HBV药物的设计、合成及生物活性研究

Nowadays, the anti-HBV agents used in clinical practice is not entirely satisfactory, because of their defects, such as the rebound phenomenon and HBV resistance. Previous research showed that phenylpropenamides, heteroaryldihydropyrimidines and MTS could target HBV core proteins and heat shock proteins respectively, thus exhibiting advantages in overcoming rebound phenomenon or HBV resistance. More importantly, their pharmacophores are similar. With these in mind, a series of novel anti-HBV agents were designed and synthesized based on fused pharmacophore approach. These anti-HBV agents could interfere HBV core protein and regulate the heat shock protein expression in host cells simultaneously, thus overcoming rebound phenomenon and HBV resistance. In addition, their bioactivities and action mechanism in cellular and molecular levels were conducted, including the effects of the active compounds on the assembly of HBV core protein and the expression of heat shock proteins (HSC70, HSP90) in host cells. The successful implementation of this project could provide a novel strategy for the design of novel anti-HBV drugs, and lay a good foundation for the development of innovative anti-HBV candidates.

目前临床使用的抗乙肝病毒（hepatitis B virus, HBV）药物存在停药“反跳”、病毒耐药等问题，使其应用受到限制。研究发现，苯基丙烯酰胺类、异芳基二氢嘧啶类和苯丙氨酸二肽类化合物分别作用于核心蛋白和热休克蛋白，在克服“反跳”或耐药方面具有一定的优势，且具有相似的药效团。基于此，本项目拟借鉴药效团融合策略，根据三类化合物药效团重叠程度的不同进行融合，设计合成具有干扰HBV核心蛋白组装和调节热休克蛋白表达双重作用的新型抗HBV化合物，并在此基础上进行结构修饰，从细胞、分子水平研究化合物的生物活性和作用机制，以期获得活性较好、能够调控HBV生命周期中的关键环节如HBV核心蛋白的组装及宿主细胞热休克蛋白HSC70和/或HSP90的表达的化合物，以克服现有抗HBV药物存在的“反跳”及耐药问题。本项目的成功实施可为抗HBV药物的研究提供新的思路，同时也为发现新型抗HBV候选新药打下良好的基础。

目前临床使用的抗乙肝病毒（hepatitis B virus, HBV）药物存在停药“反跳”、病毒耐药等问题，使其应用受到限制。本项目借鉴药效团融合策略及先导化合物优化策略设计合成化合物，以期发现新型抗HBV候选药物。根据苯基丙烯酰胺类和苯丙氨酸二肽类化合物药效团重叠程度的不同进行融合，并在此基础上进行结构修饰，针对性地设计合成了苯丙酰胺类和苯基丙烯酰胺类化合物共计55个。根据苯丙氨酸二肽类、苯基丙烯酰胺类和异芳香二氢嘧啶类化合物药效团重叠程度的不同进行融合、修饰，针对性地设计合成了45个喹唑啉酮类化合物。抗HBV活性研究发现，苯基丙烯酰胺类和喹唑啉酮类化合物具有较强的抗HBV活性，部分化合物的活性优于先导化合物。抗耐药HBV活性测试结果显示耐药细胞HepG2 A64上的突变位点（rtLl80M + rtM204V + rtTl84L）对融合型苯基丙烯酰胺类及喹唑啉酮类化合物依然敏感。作用机制研究发现，苯基丙烯酰胺类化合物通过影响HBV前基因组RNA的表达及核心蛋白的组装发挥抗HBV活性，而喹唑啉酮类化合物通过影响核心蛋白的组装发挥抗HBV活性。本研究发现了2个抗HBV候选化合物，该化合物具有与核苷类药物拉米夫定相当的抗HBV活性，对恩替卡韦/拉米夫定联合耐药株的HBV DNA复制具有抑制作用，值得进一步研究。在本项目的资助下，共发表SCI论文7篇；申请国家发明专利3项，已授权1项；培养硕士研究生3名。