Nurr1在吗啡依赖致神经损伤中的作用机制研究

Multiple adaptive changes in molecular and cellular function in the central nervous system have been shown after morphine dependence, which can lead to pathology changes of neurotransmitter, nerve cells as well as nerve fibers, and finally result in nerve injury. The proliferation and differentiation of neural stem cell to generate new cells increase after any form of brain damage. However, the survival rate of these new neurons is very low. Therefore, improving the survival rate of newborn neurons has been a critical issue of nerve repairment. Nurr1 is a member of the nuclear receptor superfamily and is a regulatory factor of differentiation, migration, and maturation. This project will further explore the mechanisms of dynamic changes of Nurr1 expression and the interaction of related proteins in nerve injury induced by morphine dependence.We will systematically observe the impact of inhibition of Nurr1 gene, with Nurr1 AS-ODNs or RNA interference, on differentiation and migration of nascent nerve cells, which is helpful to find a new therapy target for nerve injury incuced by morphine dependence or other factors.

吗啡依赖可导致中枢神经系统一系列分子和细胞功能的改变，引起神经递质、神经细胞、神经纤维发生病理学改变，最终导致严重的神经损伤。任何方式的神经损伤后均有内源性神经干细胞增殖、分化而产生新的神经细胞，但目前研究表明这些新生的神经细胞能够存活的数量很少，因此如何提高新生神经细胞的存活率是目前神经修复的重要课题。Nurr1是孤儿核受体超家族的一员，是神经细胞分化、迁移、成熟的重要调控因子，本研究拟在前期研究基础上探讨吗啡依赖导致神经损伤后Nurr1表达变化及与相关蛋白的相互作用机制。整体实验拟采用Nurr1反义寡核苷酸，体外细胞实验拟采用RNAi干扰技术，系统观察抑制及过表达Nurr1对吗啡依赖导致神经损伤后新生神经细胞分化迁移的影响，试图为吗啡依赖及其它原因导致的神经损伤的防治寻找新的途径。

吗啡依赖可导致中枢神经系统一系列分子和细胞功能的改变，引起神经递质、神经细胞、神经纤维发生病理学改变。任何方式的神经损伤后均有内源性神经干细胞增殖、分化而产生新的神经细胞。Nu rr1是孤儿核受体超家族的一员，是神经细胞分化、迁移、成熟的重要调控因子，我们的研究结果显示随吗啡依赖时间的延长大脑皮层、海马神经细胞发生了明显的损伤，损伤后脑室周围神经干细胞的增殖及新生神经细胞的分化受到了影响，Ki67及Nurr1的表达呈下降趋势，提示吗啡影响了内源性神经干细胞的增殖及新生神经细胞的分化。中脑多巴胺系统是药物成瘾的最关键脑区之一，在参与中脑多巴胺能神经细胞发育以及生理功能的众多转录因子中，Nurr1、Pitx3、酪氨酸羟化酶（TH）发挥着重要的调节功能，可能共同作用参与多巴胺能神经细胞的分化和维持。本研究通过HE染色、硫瑾染色、Fluoro-Jade B荧光标记结果显示：随吗啡依赖时间的延长，VTA及SN的多巴胺神经细胞从最初的组织水肿、胶质细胞增生、尼氏体消失逐渐演变为神经细胞的死亡，提示长时程慢性吗啡依赖可导致中脑多巴胺神经细胞的变性死亡。研究还采用Western blot、免疫荧光（激光共聚焦显微镜观察）等多种先进技术研究了相关调节蛋白的表达变化及相互作用关系，结果证实慢性吗啡依赖使多巴胺调节因子Nurr1、Pitx3的表达降低，不能有效调控TH的表达，多巴胺神经细胞的生存受到了影响，导致了多巴胺神经细胞的明显损伤。提示慢性吗啡依赖中Nurr1、Pitx3及TH表达的降低可能是引发多巴胺神经细胞损伤的重要途径之一。.为慢性吗啡依赖导致神经损伤的机制研究提供了病理形态学依据，为吗啡导致神经损伤的防治提供了新的思路。