核转录因子Gli1及mTOR信号介导的细胞自噬在软骨肉瘤耐药过程中的作用及机制研究

Surgical excision is the only treatment of chondrosarcoma, which resistances to the chemoradiotherapy. .IHh signaling pathways play an important role in the occurrence and development of chondrosarcoma, nuclear transcription factor Gli1 is a key transcription regulatory factors IHh pathways. our previous studies shown that blocking Gli1 could suppress chondrosarcoma cell growth and cellcycle progression and induced apoptosis as well as autophagy, but chondrosarcoma still resistances to the effect of Gli1 siRNA, Nuclear transcription factor Gli1 regulated the cell autophagy which mediated by mTOR signaling in the process of drug resistance and mechanism research of chondrosarcoma. Therefore, this topic is aim to certify the protective effect of autophagy which enhances Gli1 siRNA induced apoptosis in chondrosarcoma．And we will explore the mechanism that nuclear transcription factor Gli1 regulated the cell autophagy which mediated by mTOR signaling. Then, combined with chemotherapeutic drugs Adriamycin, we will demonstrate that blocking the Gli1 transcriptional factor and inhibiting autophagy which may increase chondrosarcoma chemotherapy sensitivity and reverse standard chemotherapy drug resistancet.

手术切除是目前治疗软骨肉瘤的唯一手段，软骨肉瘤对放化疗无效。Indian Hedgehog(IHh)信号传导通路在软骨肉瘤的发生发展中起关键作用，核转录因子Gli1是IHh通路最终的转录调控因子，我们前期研究显示阻断Gli1 可以抑制软骨肉瘤细胞生长，导致周期阻滞，诱导凋亡及自噬的发生，但是细胞周期阻滞及凋亡效果不明显，软骨肉瘤对以Gli1为新的靶目标开发的干扰技术或新药可产生耐药性，阻断核转录因子Gli1诱导mTOR介导的细胞自噬的发生可能导致软骨肉瘤耐药性的原因，所以本课题将于体内外实验明确阻断Gli1诱导软骨肉瘤细胞自噬对软骨肉瘤细胞抗凋亡保护作用，探索核转录因子Gli1及mTOR介导的细胞自噬在软骨肉瘤耐药过程中的功能效应和机制，联合化疗药物，验证阻断Gli1转录因子及抑制自噬增加软骨肉瘤化疗敏感性及逆转常规化疗药物耐药，从而为软骨肉瘤的治疗提供可靠的实验基础。

手术切除是目前治疗软骨肉瘤的唯一手段，软骨肉瘤对放化疗无效。Indian Hedgehog(IHh)信号传导通路在软骨肉瘤的发生发展中起关键作用，核转录因子Gli1是IHh通路最终的转录调控因子，我们前期研究显示阻断Gli1 可以抑制软骨肉瘤细胞生长，导致周期阻滞，诱导凋亡及自噬的发生，但是细胞周期阻滞及凋亡效果不明显，软骨肉瘤对以Gli1为新的靶目标开发的干扰技术或新药可产生耐药性，阻断核转录因子Gli1诱导mTOR介导的细胞自噬的发生可能导致软骨肉瘤耐药性的原因，所以本课题将于体内外实验明确阻断核转录因子Gli1诱导的细胞自噬对软骨肉瘤细胞的抗凋亡保护作用/促凋亡作用, 探索核转录因子Gli1及mTOR介导的细胞自噬在软骨肉瘤耐药过程中的功能效应和机制，联合化疗药物，验证阻断Gli1转录因子及抑制/促进自噬增加软骨肉瘤化疗敏感性及逆转常规化疗药物耐药，从而为软骨肉瘤的治疗提供可靠的实验基础。本项目通过研究发现阻断核转录因子Gli1诱导的细胞自噬是一种死亡方式，其机制是通过降低mTOR的磷酸化来实现调控的。进一步的体内实验证实了Gli1抑制剂GANT61可以诱导自噬性死亡的发生，从而进一步抑制软骨肉瘤的生长，并且调控自噬的信号通路主要是依靠激活非经典的NF-κB信号通路来实现的。并且除了先前我们证实的mTOR外，ULK1和TICAM1也参与了其中的调控过程。最后我们验证了在软骨肉瘤耐阿霉素动物模型中证实了阻断Gli1转录因子及促进自噬增加软骨肉瘤化疗敏感性及逆转耐药性，从而为临床提高软骨肉瘤化疗敏感性及逆转常规化疗药物耐药提供可靠的实验基础。