心肌重构时调控基质腱糖蛋白表达的纤连蛋白降解片段鉴定及功能研究

正常心肌由完整的纤连蛋白(FN)组成支撑结构，而无腱糖蛋白(TN-C)表达。我们发现心肌重构伴随FN降解和TN-C再表达，且FN降解片段与TN-C表达水平呈正相关。新近发现TN-C能促进心肌重构，但FN降解片段调控TN-C表达的机制尚不清楚。在申请人前期工作的基础上结合最新进展，我们提出FN降解片段调控TN-C表达并藉此调节心肌重构的理论假设。我们拟采用基因操作、多肽技术和药理干预等分子生物学技术通过研究FN片段调控TN-C表达的机制来验证假说；鉴定和筛选影响TN-C表达的FN片段；探讨FN片段在基因和多肽水平上调节TN-C表达的功能作用及调控模式；明确FN type III区变异是否参与TN-C表达；验证FN片段对大鼠梗死后心肌TN-C表达及心肌重构病程的影响。旨在揭示FN片段调控心肌重构的有效机制，有望为延缓或逆转心肌重构提供新思路。

本研究主要研究了纤连蛋白（FN）降解片段在心肌基质重构中的作用与机制。首先，构建了FN的7个分解片段的慢病毒载体，构建了心肌细胞与心肌成纤维细胞共培养的心肌基质重构细胞模型，发现部分FN片段可上调腱糖蛋白（TN-C）的表达，并增加胶原纤维沉积，从而诱导心肌机制重构；其次，在梗死后心肌重构动物模型中，采用基质金属蛋白酶（MMP）抑制剂进行治疗，发现MMP抑制剂可减少FN的分解和FN裂解片段的产生，减少心肌基质重构，从而缓解梗死后心肌重构的程度。本研究深化了对心肌基质重构病理机制的理解，为心肌重构的防治提供了新靶点。