基于外泌体介导Rab27探讨肠安方对溃疡性结肠炎黏膜免疫的作用机制研究

Ulcerative colitis (UC) is a kind of refractory intestinal inflammatory disease, the main pathogenesis of which is intestinal mucosal immune response. Exosomes, a small membrane vesicles that secreted into the extracellular environment, are emerging as another important intercellular messenger in immune responses. RAB27 is a small GTPases involved in exosome secretion, involved in Treg cells in the immune response of microRNAs. It is one of the main causes of UC: the balance of Th17 / Treg. Studying of RAB27 as the carrier in the body with GSK-3 beta signaling pathways, the miRNA way of delivering information can be revealed, it will be to understand the relationship of GSK- 3 beta signaling pathways and Th17 / Treg balance in UC. At the same time, we use im Chinese medicine CAS to intervene, in order to exploring the effects of traditional Chinese medicine(TCM) on GSK- 3 beta signaling pathways and the role of Th17 / Treg balance and influence, further reveal the pathogenesis of UC and explore the traditional TCM targets for the treatment of UC.

溃疡性结肠炎（UC）是指一种原因不明的非特异肠道炎症性疾，迄今病因和发病机制尚不明确。外泌体（Exosomes）是免疫细胞间的功能性载体，其中RAB27是目前被发现存在于肠道黏膜外泌体中参与Treg细胞免疫反应的miRNA。近年的研究表明Th17/Treg平衡是维持肠道免疫稳态的重要因素，其失衡是导致UC的主要原因之一。以外泌体中RAB27为载体，研究RAB27与GSK-3β信号通路的关系，可揭示miRNA递送信息的途径，有利于了解外泌体与GSK-3β信号通路调控Th17/Treg平衡在UC中的作用。同时，我们用清热解毒中药肠安方进行干预，探索中药对肠道外泌体与GSK-3β信号通路和Th17/Treg平衡的作用和影响，进一步揭示UC的发病机制和探索中药治疗UC的作用靶点。

溃疡性结肠炎(UC)是一种发病机制尚不明确的难治性的非特异性肠道炎症。肠道黏膜免疫反应是UC的主要发病机制之一，由于免疫内环境的失衡，导致肠道Treg细胞、巨噬细胞等多种免疫细胞调节功能紊乱，多种免疫细胞受到不同的刺激后会分泌不同类型的外泌体。外泌体是细胞自身分泌的胞外囊泡的一员，可介导细胞之间的物质传递或信息交流，外泌体运用自身载体多种miRNA的特性，通过调节免疫细胞分化、抑制促炎因子分泌以及影响肠道屏障功能在UC发病中发挥维持肠道稳态的作用。.Rab27a和Rab27b是参与T细胞和调节性T细胞（Treg）外泌体分泌时的2 种小型鸟嘌呤核苷酸酶（GTPases），是在细胞质膜上对接多泡核内体上的蛋白因子，通过影响Rab27效应器来释放外泌体。Rab27调节外泌体的信号通路对于Treg细胞的RNA的信息的传递表达发挥作用，Rab27a和Rab27b缺陷型Treg细胞分泌的外泌体miRNAs向T细胞的转移受阻，能导致外泌体分泌减少50%以上，使得Treg细胞丧失了免疫防御功能，更易受到炎症因子的侵袭。M2巨噬细胞衍生的外泌体通过影响CCL1、CCR8等相关趋化因子来上调Treg细胞表达，通过GSK-β、AGE/RAGE信号通路影响Th17/Treg、M1/M2平衡，下调IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-17A等炎症因子的表达来缓解症状。.外泌体分布全身，具有很多生理调节功能，如同“气”的中医理论“正气存内，邪不可干，正气不足，内生五邪”。本研究试图阐述外泌体与中医“气”特性，“气”可为“正气”或“邪气”（可外感六淫，可内生五邪），体内很多免疫细胞受到不同的应激可以分泌不同来源的外泌体，影响Treg的功能，继而影响肠道黏膜损伤和修复。“清热祛湿”法正是清除免疫炎症因子、改善肠道内环境和调节免疫功能的过程。中药复方肠安方是源于“白头翁汤”加减，本研究尝试通过研究外泌体在RAB27的影响下肠道黏膜免疫的变化，阐述肠安方可通过清热祛湿-抑制炎症因子来提高肠道免疫屏障、免疫修复功能，为寻找中药的作用靶点和构建符合临床实际的中医病症结合的动物模型提供实验基础。