Rho—Wnt/β-catenin新交互通路在牙髓细胞早期修复的作用及分子机制研究

牙髓细胞的增殖、迁移和分化是牙髓早期修复的关键，但迄今三种修复活动的相互关系和作用机制尚未明确。大量研究证实Wnt/β-catenin在牙髓细胞分化中起着关键作用，课题组在发现Rho/ROCK通路是牙髓细胞迁移的主要调控通路的基础上，又发现Rho和Wnt/β-catenin之间存在一定的交互对话且与牙髓细胞的迁移和分化相关，两条通路之间的串话和调控可能是决定牙髓细胞迁移还是分化的信号开关，直接影响牙髓细胞迁移或分化的时机和效率。为探讨牙髓修复机制，本课题采用RNA干扰、转染等现代分子生物学技术，以Rho、Wnt/β-catenin通路及二者的交互作用为突破口，研究Rho和Wnt/β-catenin的串话途径开启牙髓细胞增殖、迁移、分化效应的时机和作用大小，探索其中关键的"开关分子"。本研究有助于深入了解牙髓损伤早期参与修复调控的信号机制，为建立保存牙髓治疗提供了新的思路。

牙髓修复过程中，细胞的迁移、分化和凋亡都是决定修复成功与否的因素。组织出现炎症时，活化的血小板释放溶血磷脂酸LPA参与组织修复。课题组前期研究表明，LPA具有调控牙髓细胞迁移，分化和凋亡的潜能，而这些生物学效应都与Rho通路和其下游相关通路有一定联系。本研究旨在探索Rho/ROCK通路与Wnt经典通路、mDia和ERK通路之间可能的相互串话和作用。结果显示：1、Rho下游效应分子ROCK通路是牙髓细胞迁移和维持细胞形态的主要调控通路，mDia作为补充和辅助通路也参与迁移调控。同时，Rho/ROCK和Rho/mDia1的串话共同调控黏着斑激酶FAK介导的牙髓细胞黏附。2、Rho和Wnt经典通路之间具有交互作用，实验中部分证据表明ROCK是关键节点。3、溶血磷脂酸LPA通过Rho和其他相关通路如ERK、FAK的调控，抑制缺血缺氧环境下牙髓细胞的凋亡。本项目的研究提示LPA和其激活的Rho通路在牙髓组织早期修复中发挥重要作用，包括：1、促进牙髓细胞早期迁移；2、通过调节细胞骨架形成和细胞黏附影响细胞迁移；3、在牙髓细胞迁移和修复过程中抑制细胞凋亡。