水稻耐受生物胁迫相关WRKY基因的克隆及功能鉴定

利用反向遗传学方法从10个水稻候选WRKY基因中鉴定出两个抗病/虫基因OsWRKY03和OsWRKY10。本项目进一步研究他们在抗病/虫防御中的机制。对OsWRKY03超表达水稻出现超敏反应进行生理生化分析。质谱技术鉴定OsWRKY03蛋白中是否存在磷酸化位点，并进一步研究这些位点对抗病防御信号传导的影响。在病原诱导型启动子RCH（水稻几丁质酶）的控制下研究OsWRKY03转基因水稻的抗病性。检测OsWRKY10超表达转基因水稻中的抗虫拒食物质的含量，并对其抗虫性进行鉴定。通过酵母双杂交方法，从损伤cDNA文库中分离OsWRKY10蛋白相互作用蛋白，从中进一步获得关于抗虫防御信号传导的信息。进一步从已克隆的候选WRKY基因中鉴定新的抗病基因。该研究以WRKY转录因子为切入点，利用反向遗传学方法获得关于水稻的抗病/虫防御机制的认识，并期望获得有应用前景的抗病/虫功能基因。