茵陈五苓散调脂作用的信号转导机制研究

本项目拟在我们多年研究的基础上，用已建立的高脂血症大鼠为研究模型，分析茵陈五苓散对高脂血症大鼠血脂及其肝组织LDL-R、p38MAPK和p42/p44MAPK表达和功能的影响。同时，借助永生化的人正常肝细胞系HLO2细胞，分析过表达p38MAPK和p42/44MAPK以及阻断p38MAPK和p42/44MAPK活性后，茵陈五苓散对LDL、LDL-R、p38MAPK 和p42/44MAPK的表达和功能以及p38MAPK与p42/44MAPK之间信息交流（cross-talk）的影响。最后，采用蛋白质组学方法筛选茵陈五苓散作用的相关蛋白质，构建其作用相关蛋白质的信号网络图。本研究有望从信号转导途径，揭示茵陈五苓散清热利湿法调控脂质代谢的分子机制，丰富中医调脂方法理论，为中医防治高脂血症提供理论依据。

茵陈五苓散是《金匮要略》中清热利湿的经典名方，我们的前期临床研究证实其有良好的调脂效果。本课题通过动物实验、分子生物学、蛋白质组学等技术，用我们已建立的高脂血症大鼠为研究模型，借助永生化的人正常肝细胞系 HLO2 细胞，发现了茵陈五苓散治疗高脂血症的相关蛋白，并阐明了茵陈五苓散通过p38、p42/44MAPK及其cross-talk调脂作用的分子机制。取得了如下成果：1，动物实验结果表明：茵陈五苓散通过调节p38MAPK和p42/44MAPK信号通路，从而影响肝细胞膜上LDL-R的表达，发挥其调节脂蛋白代谢的作用，阐明了茵陈五苓散治疗高脂血症的分子机制；2，通过蛋白质组学的研究，构建其作用相关蛋白质的信号网络图，发现了茵陈五苓散治疗高脂血症的相关差异蛋白：载脂蛋白E、甲状腺激素结合蛋白、维生素D结合蛋白、血清白蛋白、纤维蛋白原样蛋白 1、T激肽原2、补体C3、补体C4 、补体C4b结合蛋白alpha 链、免疫球蛋白 kappa-2 链C区、免疫球蛋白lambda-2链C区、溶菌酶C、甘露糖结合蛋白C、血红素结合蛋白和转铁蛋白等，并进行了验证；3，研究证实p38MAPK和 p42/44MAPK之间存在信号交流，茵陈五苓散能通过调控该通路，从而影响HLO2细胞中LDL-R的表达，是其调脂的核心和关键。