新型c-Kit拮抗剂的设计、合成及抗肿瘤活性研究

干细胞因子受体（c-Kit）是近年来治疗急性骨髓系白血病领域的研究热点之一。本项目在27个c-Kit拮抗剂构效关系研究的基础上，以计算机辅助药物设计为手段，建立的药效团模型，设计并合成一类新型的四氢喹啉类c-Kit拮抗剂，前期实验证明得到的新化合物有可能是一类具有治疗急性骨髓系白血病的c-Kit拮抗剂，并在前期研究工作的基础上，依靠已建立的药效团模型和传统药物设计思想对先导化合物进行结构改造，再根据抗肿瘤活性和细胞毒性数据，指导后期的结构修饰，选出3-4个最优的化合物在接种HL-60细胞的小鼠模型上开展抗肿瘤活性研究，考察候选化合物用于治疗白血病的可能性。

经过三年的研究，本项目设计并合成了一系列四氢喹啉类c-Kit受体拮抗剂，并在体外针对HL-60细胞进行了抗肿瘤活性测定，结果显示该类化合物对HL-60细胞都具有不同程度的抑制作用，其作用强度依赖于R基团、X基团、n值的不同而异；我们借助前期已建立的c-Kit拮抗剂药效团模型，运用申报书中提出的“设计—合成—活性测定—构效关系分析—设计”的方法学思路，总结出了该类结构的初步构效关系，这将为进一步深入研究提供具有实验基础的结构优化指导；在构效关系的研究过程中，我们筛选出了一些活性较强的化合物进行体内抗肿瘤活性研究，实验结果显示这些化合物在对血液中HL-60细胞的增殖产生抑制作用的剂量下不会对正常组织器官造成损害，给药组裸鼠生存率高于空白对照组；下一步我们将会研究其作用机制以及相应的信号途径，从分子水平上阐明该类化合物的作用方式，为发现活性更好的化合物奠定分子生物学基础。此外，我们在项目研究过程初期还对该类化合物的抗瘤谱进行了探索性研究，发现的该类化合物对肝癌细胞Hep G2有更强的杀伤作用，于是我们采用差异蛋白质组学技术对先导化合物作用进行研究，结果显示先导化合物的作用使得细胞内以代谢为核心的一系列蛋白质发生了表达变化，之后我们通过蛋白质质谱对其进行鉴定，发现先导化合物与PKM2具有相互作用，这发现将成为我们今后研究工作的另一个重点方向。