HPV16E7参与宫颈鳞癌细胞恶性增殖和侵袭生长的分子机制

预防恶性肿瘤的侵袭性生长和转移是肿瘤防治中的难题。已证实高迁移率蛋白家族A1（HMGA1）是参与鳞状上皮细胞恶变以及转移的重要分子，在高危型人乳头瘤病毒（HPV）持续感染导致鳞状细胞发生恶变后有HMGA1高表达，并同时伴有p53/Notch1信号转导通路多个环节的紊乱；我们前期研究也发现HPV16E7能促进HMGA1表达，后者能诱导p53发生凋亡，下调Notch1表达，但HMGA1所起的具体作用机制不清，推测HPV16E7与HMGA1可能会相互影响、协同参与宫颈癌增殖和侵袭生长。本课题拟以人宫颈癌细胞Caski为研究对象，应用慢病毒载体、荧光素酶报告基因等技术，探讨并评价HPV16E7与HMGA1在p53/Notch1信号转导途径中相互作用调控细胞周期的可能。这将有助于深入理解HPV16E7促进鳞癌细胞异常增殖和侵袭性生长的分子学机制及HPV相关恶性肿瘤耐药性机制，为其防治提供新的治疗靶点

高迁移率蛋白A（High Mobility Group A，HMGA）家族由四种蛋白组成，包括由HMGA1基因编码通过可变剪接而成的HMGA1a, HMGA1b，HMGA1c以及由其同源基因编码的HMGA2。HMGA蛋白本身没有转录活性，但是它能改变核染色质的结构。在正常成熟的组织中，它的表达缺失或者非常低，但是在恶性肿瘤中HMGA基因却过度表达。HMGA1和HMGA2 蛋白的表达与恶性表型高度一致，事实上，高水平的HMGA1蛋白表达水平和淋巴结中的转移以及临床分期密切相关。预防恶性肿瘤的侵袭性生长和转移是肿瘤防治中的难题。已证实高迁移率蛋白家族A1（HMGA1）是参与鳞状上皮细胞恶变以及转移的重要分子，在高危型人乳头瘤病毒（HPV）持续感染导致鳞状细胞发生恶变后有HMGA1高表达，并同时伴有p53/Notch1信号转导通路多个环节的紊乱；本课题以人宫颈癌细胞Caski为研究对象，应用慢病毒载体、荧光素酶报告基因等技术，构建了HPV16E7 真核表达质粒转染Caski 细胞，细胞中HMGA1表达水平进一步增高，Notch1 和p53 表达下降甚至缺失，通过细胞侵袭性实验研究发现肿瘤细胞的恶性程度和侵袭性都有加剧，我们研究也发现HPV16E7能促进HMGA1表达，后者能诱导p53发生凋亡，下调Notch1表达，HMGA1对HPV中E6/E7原癌蛋白的完整表达非常重要，HPV16E7通过产生HMGA1干扰p53/Notch1 信号，影响Notch1 对细胞增殖的抑制性调控，加剧肿瘤细胞的恶性程度和侵袭性；继而又进一步促进了E6、E7 和HMGA1 的活化，加剧细胞周期的紊乱。在本项目中，我们该实验从基础研究角度证实了，采用RNA干扰技术抑制HMGA1的表达，对HPV相关恶性肿瘤的恶性程度和转移性、侵袭性都有很重要的抑制作用，提示这可能是肿瘤治疗的一个新的靶点，对于将来进一步研究HMGA1对肿瘤多能干活性/分化，开发新的药物非常有益，这将是未来该课题组继续研究的一个重要方向。