补肾填精方减少卵巢切除小鼠骨丢失延缓膝关节软骨退变的研究

Osteoporotic animal model that accompany with osteoarthritis (OA) always causes significant impairment on articular cartilage in contrast to OA.These findings indicate that osteoporosis may be one risk of the occurrence or at least accelerate the process of OA. In addition, the risk of osteoporosis will be more pronounced as the OA go worsen. Our investigations will be performed to address the following two points:. 1. Our study first want establish that osteoporosis play its roles in promoting the development of OA. We selected the mice models as: 1) high bone mass in subchondral bone, 2) OVX- induced bone loss, 3) OVX with OA, to investigate the regulatory effects of the changes of bone mass in subchondral bone in affecting the development of OA.. 2. We try to address the scientific contents of the theory of“Kidney dominating bone”in TCM by observing the protective effects of TKNEP in attenuating degeneration of articular cartilage in knee that induced by OVX.

骨质疏松症合并OA模型与单纯OA动物模型相比，前者对于关节软骨的损害明显高于后者，因此认为骨质疏松症可能是OA发病的一种危险因素或加速膝骨关节炎病情发展。此外，随着OA的进展会引起骨量减少，诱发骨质疏松症的出现。本研究拟从以下两个方面展开：. (一)分别利用软骨下骨骨量增加小鼠模型、去卵巢模型（OVX）、OA模型、去卵巢复合OA模型分别研究软骨下骨骨量增加和减少对膝骨关节炎退变的作用，从而证明骨质疏松与膝骨关节炎发生发展的作用。. (二)观察补肾填精方通过抑制OVX小鼠骨丢失而延缓膝骨关节炎退变的药效作用，从而进一步阐明中医“肾主骨”理论和异病同治的科学内涵。

骨质疏松症及骨性关节炎引起的骨退行性疾病两种疾病在临床上存在相关性，骨质疏松症或可加速膝骨关节炎病情进展，膝骨关节炎或可导致骨质疏松，两者相互影响，互为因果，常常合并发病。中医肾主骨理论认为，肾精虚损是骨质疏松与骨性关节炎的共有病机，补肾填精法防治骨质疏松症合并骨性关节炎方案具有一定的可行性，因此，阐述二者之间的关系不仅能揭示疾病的发生发展机制，对于两者的异病同治也具有重要意义。.利用Osx-Cre,Axin1fx/fx基因敲除小鼠激活wnt-beta-catenin信号途径，激活成骨细胞生成的基础上复合的OA手术模型证明，软骨下骨骨量的增加能够有效减轻关节炎病理改变。利用补肾填精方干预双侧去卵巢小鼠的实验发现补肾填精方可显著增加小鼠腰椎骨量，提高腰椎骨密度度，同时也能提高软骨下骨骨量（BV/TV），增加软骨下骨骨密度（BMD），减小骨小梁间隙（Tb.Sp）从而能够治疗骨质疏松症。.组织学AlicianBlue染色显示利用补肾填精方干预双侧去卵巢的小鼠及复合OA模型发现，与福善美组及模型组相比，中药组能显著延缓膝关节软骨退变，抑制半月板钙化，增加深层软骨基质表达。.组织学Trap染色显示中药干预组及福善美干预组破骨细胞阳性染色显著少于模型组，提示中药干预后可抑制破骨活性，使其破骨作用减弱，减少破骨细胞生成抑制骨质疏松。.免疫组织化学染色显示模型组II型胶原阳性表达明显减少,中药干预组小鼠膝关节软骨表面稍有不平整，软骨层稍变薄，关节软骨边缘骨赘形成和半月板钙化增加较模型组均有明显减轻.II型胶原染色区域相较西药及生理盐水组变化不明显，关节炎病理改变得到较好控制，中药干预组及福善美组关节软骨下骨mmp9表达降低，beta-catenin表达增多，模型组beta-catenin阳性表达减少。