大豆异黄酮诱导斑马鱼肝细胞合成VTG的作用机理研究

大豆异黄酮富集于水体及鱼饲料中，显著促进鱼类卵黄原蛋白（VTG）的合成。但其作用机理尚不清楚。传统认为，大豆异黄酮能激活雌激素受体ERs，使之作用于VTG基因vtgs启动区的雌激素受体作用元件(ERE)，从而调控vtgs的转录表达。但我们在前期工作中发现，过氧化物酶体增生物激活受体PPARs是大豆异黄酮的又一重要分子靶点。激活的PPARs也能作用于一些vtgs基因的ERE，并可能对vtgs的表达起竞争性抑制作用。本课题拟以斑马鱼的离体肝细胞为材料，利用ERs和PPARs的专一性拮抗剂，检测大豆异黄酮诱导VTG合成对ERs的依赖性，查明PPARs的激活是否对ERs调节的VTG表达起竞争性抑制作用；并采用实时定量PCR技术，测定大豆异黄酮对ERs和PPARs mRNA表达的影响。本项目的研究成果将深入揭示植物雌激素的作用机理，也为正确评价植物雌激素对鱼类的影响，开发新型鱼饲料奠定理论基础。