肠道菌群对肉仔鸡脂类代谢、肠道免疫及其相关基因表达的研究

选择来自SPF鸡群的种蛋，经无菌处理后采用无菌孵化，转入3台不同无菌隔离器内饲养，并分别饲喂经钴60辐射灭菌的无菌饲料（CT）、无菌料+乳酸杆菌培养液（LB）、或无菌饲料+鸡肓肠微生物(CON)。饲养3周后屠宰取样（每组8只），从十二指肠、空肠、回肠取食糜测定葡萄糖、叶黄素、脂肪酸和淀粉酶和脂肪酶，各肠段测定形态结构，取血液测定葡萄糖、乳糜微粒、VLDL、HLDL、TG和胆固醇含量，取空肠和回肠组织用RT-PCR测定脂肪酸结合蛋白（FABP）、G蛋白偶联受体-4（GPR4)和PPAR等mRNA表达量、取肝脏、脂肪组织测定ACC1、FABP、LPL、FAS等mRNA的表达量。试验二选SPF种蛋无菌孵化后，分3组分别饲喂无菌饲料（CT）、LB饲料和COV饲料，7日龄后各组加入沙门氏菌,1周后屠宰取肠道组织用ELSA测定SIgA，取血清测定IgA IgM TNF-a和IL-6和IL-10含量.

为研究鸡肠道菌群对宿主营养代谢和肠道免疫功能的影响，选择来自SPF鸡群的种蛋，经无菌孵化后，进入无菌隔离器内饲养，建立“无菌鸡”饲养模型。分别饲喂经钴60辐射灭菌的无菌饲料（CT）、无菌料+乳酸杆菌培养液（LB）、或无菌饲料+鸡肓肠微生物(CON)。饲养3周后屠宰测定各组织器官的发育，血液生化指标，空肠、肝脏和脂肪组织的相关基因的表达量。结果显示，肠道菌群能促进雏鸡十二指肠和空肠长度增加，使十二指肠、空肠和回肠隐窝深度降低、绒毛高度/隐窝深度增大；但盲肠长度和体积均显著低于无菌鸡。此外，肠道菌群还促进脾脏的发育，提高仔鸡腹脂率、肌胃率和肝脂率及免疫器官指数（P<0.05）；提高血清总蛋白、白蛋白、血糖及甘油三酯浓度，但显著降低血清胆固醇、高低密度脂蛋白浓度（P<0.05）。无菌鸡添加乳酸菌和盲肠内容物后，降低空肠组织FAS基因mRNA水平（P<0.05），并提高L-FABP基因mRNA表达量（P>0.05）；提高肝脏组织SREBP-1、ChREBP基因mRNA水平（P<0.05），提高仔鸡脂肪组织THRSP、PPARγ和LPL等基因其mRNA水平表达量（P<0.01）。试验结果说明肠道菌群可调控脂肪代谢相关基因的表达，进而影响雏鸡脂类代谢。试验二选SPF种蛋无菌孵化后，分别饲喂无菌饲料（CT）、LB饲料和COV饲料，21日龄后接种新城疫疫苗。免疫注射后，肠道菌群能显著提高了鸡血清中ND抗体水（P<0.05），降低免疫前期（1-7天）血清中总蛋白、白蛋白、IgG和IgM含量（P<0.05）。降低疫苗7天后十二指肠黏膜SIgA的分泌量降低（P<0.05），对后期（14天）十二指肠和空肠黏膜SIgA没有影响不大。表明肠道菌群对新城疫免疫注射后仔鸡免疫功能产生一定影响。