iTr35细胞和IL-35在乙型肝炎病毒感染慢性化中的作用和机制研究

iTr35 cell is a newly identified regulatory T cell which mainly produces IL-35. Exogenous IL-35 or nTreg cells producing IL-35 can promote the generation of iTr35 cells. iTr35 cells mediate suppression mainly via IL-35. In the field of hepatitis B, there are no reports on iTr35 cells and IL-35 in the chronicity of HBV infection, the development of immune tolerance and persistance of HBV infection. Our group is the first, to our knowlege, to combine the chronicity of HBV infection and the development of immune tolerance with the function of iTr35 cells and IL-35. This project is proposed to investigate the frequency and function of iTr35 cells in chronic hepatitis B patients with different inflammatory phrases using peripheral blood and liver tissues from patients and transgenic mice, as well as the relationship between intrahepatic infiltration degree and disease progression and iTr35 cells and IL-35. The role and mechanism of iTr35 cells and IL-35 in chronic hepatitis B virus infeciton will be intensively studied in order to develop new immunotherapeutic strategies for treating hepatitis B.

iTr35细胞是最新鉴定出的一类以分泌IL-35为主的新型调节性T细胞，外源性IL-35或nTreg分泌的IL-35均能促进iTr35细胞的生成；iTr35细胞主要通过IL-35发挥抑制性作用；在慢性乙型肝炎的研究中，目前尚无关于iTr35细胞和IL-35在HBV感染慢性化、免疫耐受形成和病毒持续感染中的作用和机制研究报道，本课题组首次将HBV感染慢性化及免疫耐受形成与iTr35细胞和IL-35的功能联系起来。本项目拟采用慢乙肝患者及HBV转基因小鼠的外周血和肝组织标本，分析慢性乙肝患者不同炎症期iTr35细胞在外周血中的频数和功能，以及它们在肝内的浸润程度与HBV感染病程进展的关系，并深入分析iTr35细胞和IL-35相在HBV感染慢性化中的作用与机制，为乙型肝炎的免疫治疗策略提供新的思路和方法。

iTr35细胞是最新鉴定出的一类以分泌IL-35为主的新型调节性T细胞，主要通过IL-35发挥抑制性作用。在慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染及病程进展的研究中，目前尚无相关研究报道。本课题研究了IL-35及其相关细胞因子在HBV持续感染病程进展中的作用，特别是HBV感染相关慢加急性肝衰竭（HBV-ACLF），通过健康对照、慢性乙型肝炎患者（CHB）和HBV-ACLF患者外周血，研究了IL-35及其相关细胞因子在病程进展中的作用，探讨了HBV持续感染状态下IL-35在外周血中的表达情况，重点分析了HBV持续感染重症化状态下IL-35的表达情况，研究了IL-35在HBV-ACLF中的早期预测价值，为临床早期正确决策提供实验依据。研究发现，在HBV-ACLF中外周血IL-35表达较健康对照和慢性乙型肝炎偏高。通过将ALT、AST、总胆红素、白蛋白、PT和INR等与外周血IL-35表达进行线性回归分析，发现HBV-ACLF患者外周血中IL-35表达与总胆红素、ALT和AST均呈负相关，提示基线IL-35的表达水平能够反映HBV-ACLF的病情严重程度。进一步研究发现，HBV-ACLF患者外周血IL-35的表达水平与MELD评分呈正相关（r=0.3337，P=0.0045），提示HBV-ACLF患者基线外周血IL-35水平可作为HBV-ACLF患者病情预后的评判指标。通过长期随访，根据HBV-ACLF患者病程随访终点数据，将入组患者分为存活组和非存活组，HBV-ACLF存活组（Survival）与非存活组（Non-survival）基线外周血IL-35表达水平比较，提示存活组发病时IL-35表达偏低。通过比较HBV-ACLF存活组与非存活组间IL-35表达0周至4周间的动态变化趋势，我们发现存活组病程中外周血IL-35表达呈上升趋势，而非存活组病程中IL-35呈下降趋势。通过长期随访，确定所有入组患者病程进展150天终点数据，我们以基线外周血IL-35表达值72 pg/ml作为Cutoff值对所有患者进行生存分析，发现基线外周血IL-35表达水平>72 pg/ml的患者远期预后较差，提示IL-35可作为一个潜在的预后评估生物标志物。本课题研究结果有助于进一步了解乙型肝炎病毒感染相关慢加急性肝衰竭的免疫发病机制并提供可能的免疫治疗靶点，为HBV-ACLF的诊治提供新的思路和策略。