Chmp1A基因在肾细胞癌中的功能性研究

Chmp1A（染色质修饰蛋白1A）属于ESCRT-Ⅲ复合物（转运必需内吞体分选复合物-Ⅲ）家族成员，ESCRT蛋白在细胞核中囊泡的形成过程中起着关键作用，同时在肿瘤的发生发展中起到重要作用。最近研究发现Chmp1A可能是一种新颖的胰腺癌的抑制因子，本课题组初步研究发现，在肾细胞系中可以克隆到Chmp1A基因，且高表达Chmp1A的肾肿瘤细胞增殖分化能力下降，提示Chmp1A可能是很好的肾细胞癌（RCC）抑制基因。为此本项目将通过敲除Chmp1A，考察缺失Chmp1A对正常和肿瘤肾细胞、正常和肾肿瘤模型裸鼠的影响；考察Chmp1A对细胞凋亡、肿瘤细胞表达异常的因子、肿瘤血管的形成等因素的影响，初步揭示Chmp1A抑制肾脏肿瘤的可能作用机制。本项目的成功研究将有助于揭示Chmp1A对RCC的功能及作用机制，为RCC的治疗开辟新的途径。

前期研究证实染色质修饰蛋白1A (Chmp1A)可能是肾细胞癌(RCC)的有效肿瘤抑制因子，本项目对Chmp1A的功能和机制进行研究。在基金的资助下，项目组克隆了Chmp1A基因、构建了Chmp1A的原核和真核表达载体、制备了多克隆抗体、合成了靶向Chmp1A的siRNA、构建了靶向Chmp1A的shRNA真核表达载体；通过体内外实验证实，Chmp1A可以有效抑制肾肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭等能力，并促进肿瘤细胞的凋亡；机制研究发现，Chmp1A主要通过下调肿瘤细胞的抗凋亡因子Bcl-xL和上调P53促进肿瘤细胞的凋亡，进一步研究发现，Chmp1A抑制RCC与mTOR等信号通路有密切关系；制备了Chmp1A的融合蛋白PTD-Chmp1A，并证实PTD-Chmp1A是有效的肿瘤抑制产品。本项目的成功开展为RCC的治疗提供了新的方法和思路，并为今后Chmp1A的信号通路研究提供了基础。