新型辅助性T细胞亚群-Th22在多发性硬化血脑脊液屏障开放中的作用及相关机制实验研究

T细胞介导的多发性硬化（MS）就其病理机制人们已把炎性细胞对血脑屏障（BBB）的破坏作为当今研究热点和焦点之一。而对中枢神经系统的另一非常重要门户-血脑脊液屏障（BCB）却很少有人问津。最新研究表明CCR6+Th17入侵BCB是MS发病的重要环节。这对我们研究MS发病机制提供了一条新的思路。最新研究证实表达CCR6的新型Th亚群-Th22与CCR6+Th17在功能上有非常相似作用，但Th22在MS中如何发挥作用尚未得到证实。我们前期工作中首次发现Th22可引发MS的动物模型EAE，并观察到Th22对体外BCB模型的破坏作用，这为我们进一步探讨Th22在MS/EAE作用及机制打下坚实基础。本研究以EAE为研究对象，通过分子、免疫、病理学等技术，体外建立BCB模型，深入探讨Th22在MS/EAE发病中对BCB的破坏机制。这不仅大大丰富MS发病机制的理论，对临床靶向治疗有极其重要的指导意义。

经过3年的科研工作，我们如期的完成了课题内容。通过体内外实验证实了Th22细胞的效应因子IL-22在EAE发病过程中起到了重要的作用。在实验中，我们建立了稳定的小鼠EAE动物模型，分离培养小鼠脉络丛上皮细胞，体外构建血-脑脊液屏障，检测到了在EAE发病过程中IL-22的动态变化过程，通过对小鼠EAE模型尾静脉给予IL-22的方法，确定了Th22细胞的分泌因子IL-22在EAE动物模型疾病的发生、发展中的致病性，在体外研究中证实IL-22可能通过诱导脉络丛上皮细胞产生金属蛋白酶从而对血-脑脊液屏障造成破坏继而影响EAE疾病的发生。我们还应用分子克隆的方法克隆了小鼠IL-22受体α亚单位，为进一步深入研究IL-22细胞因子以及Th22细胞的功能奠定了基础。另一方面，我们检测到在小鼠EAE发病过程中，病理性淋巴细胞对血脑屏障的粘附在疾病中起到了至关重要的作用，并且在应用t-PA处理内皮细胞后，在体内、外实验中都可以检测到内皮细胞粘附分子ICAM-1表达升高，以至于淋巴细胞和血脑屏障内皮细胞的作用增强，淋巴细胞浸润增加，在EAE动物模型中表现为发病时间早，病情严重。这从另一个角度说明了脑中屏障结构的功能对于EAE疾病的发生发展起到了至关重要的作用。我们所取得的成果以科研论文的形式发表文章3篇，其中SCI收录2篇，待发表SCI论文1篇（已接收）同时培养硕士研究生2名，七年制科研训练学生1名，完成了科研课题。