发展了一种从微生物细胞中释放胞内基因工程蛋白质的新型技术.以提取大肠杆菌表达的人肿瘤坏死因子TNF为对象,采用聚乙二醇和无机盐构成双水相体系,悬浮大肠杆菌,以水平搅拦式珠磨机为设备,在设备中实现了边破碎细胞边萃取产物,实现了萃取破碎新过程.将两道工序变为一道,利用聚乙二醇对蛋白质的保护作用避免了破碎细胞造成的产物失活.聚乙二醇和无机盐浓度对过程的优化有重要的影响.分子量在1540左右的聚乙二醇和硫酸铵能够有效地提高TNF的活性.水平搅拌式珠磨机能够在破碎细胞的同时完成双水相萃取.操作时间在三分钟内已能完成萃取破碎.在实验基础上发展了破碎基因工程菌释放胞内产物的动力学公式,与实验数据吻合较好.
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数据更新时间:2023-05-31
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