MIIP调节Rho GTPases信号通路抑制子宫内膜癌转移的机制研究

子宫内膜癌转移是影响其预后的关键因素，MIIP作为一个新发现的抑癌基因，具有较广谱的转移抑制作用。本课题组前期研究证明MIIP抑制内膜癌细胞迁移；cDNA微阵列基因表达谱显示内膜癌细胞中MIIP下调可上调Rho GTPases通路相关基因表达。Rho GTPases是调节细胞骨架改变及迁移的关键分子，然而MIIP是否通过调节Rho GTPases通路抑制内膜癌转移尚未见报道。本项目采用Western及QPCR法比较正常内膜、不典型增生、内膜癌组织(有/无淋巴结转移组)中MIIP表达水平的改变，分析MIIP是否与内膜癌发生、转移相关；通过体外及动物实验证实MIIP是否能够抑制内膜癌细胞的迁移及侵袭；通过免疫共沉淀、免疫荧光染色等方法探讨MIIP是通过Rho/ROCK、Rac/PAK通路，还是两条通路共同作用，导致细胞骨架改变，抑制内膜癌转移，为内膜癌预后判断、分子靶向及基因治疗提供理论依据。

子宫内膜癌（EC）是最常见的妇科恶性肿瘤，其发病率呈逐年上升趋势。侵袭、转移是EC患者死亡的主要原因。因此，抑制侵袭转移是提高EC患者生存率的关键。迁移侵袭抑制蛋白（MIIP）基因为新发现的候选抑癌基因, 定位于1p36，该区域在包括EC在内的多种肿瘤中缺失。但关于MIIP与EC的研究，国内外尚未见报道。本研究首先采用Western blot和免疫组织化学方法检测MIIP在人正常子宫内膜、EC组织中的表达，发现MIIP的失表达可能与EC的发生、发展有关。MIIP的失表达与EC不良病理特征（低分化、晚期及淋巴结转移）有关，提示预后不良。其次，通过体内、外试验进一步探讨MIIP是否可抑制EC的迁移及侵袭。研究发现MIIP可抑制EC细胞的迁移、侵袭及EC裸鼠移植瘤的转移。最后，则进一步从形态学及功能学两方面探讨MIIP抑制EC细胞迁移及侵袭的机制。MIIP在形态上可抑制应力纤维及细胞前缘板状伪足的形成，减少细胞迁移的驱动力，使细胞尾部无法收缩，从而抑制了EC细胞的迁移。其机制可能是MIIP通过与RhoA竞争性结合其下游作用因子Rock1、与Rac1竞争性结合其下游作用因子PAK1，阻滞了Rho/ Rock1及Rac1/ PAK1信号传导通路而发挥作用。通过本项目的研究，发表论文5篇，其中SCI论文3篇，国内核心期刊2篇。本研究的顺利完成，对认识子宫内膜癌的转移机制具有重要的理论意义：为EC 预后判断提供新的分子标志物(MIIP)，为EC 转移、侵袭的分子机制研究提供新线索。对EC的预防和治疗具有重要的临床实用价值：对Rho GTPase信号通路进行阻断可有效抑制肿瘤细胞的侵袭和转移过程，是肿瘤治疗的新方法。本项目证实MIIP 通过阻断Rho GTPases 信号传导通路发挥抑制EC细胞转移的作用，则可通过恢复MIIP 表达，干扰Rho GTPases 信号传导过程中的关键基因，达到减少或抑制EC 转移的目的，从而为开辟EC 治疗的新途径提供理论基础和数据支持。