INKIT调控NF-κB介导非酒精性脂肪肝炎的功能研究

Nonalcoholic steatohepatitis (NASH) is a common pathological of various metabolic disease, however, the pathogenic mechanism of NASH is not fully elucidated and there is no effective clinical treatment yet so far. Our previous studies indicated that INKIT negatively regulated the antiviral response by inhibiting the activity of NF-κB and reducing the inflammatory response. Since the inflammatory response is an important factor of NASH development, therefore, we propose that INKIT may be involved in the development of NASH. Our preliminary results indicate that INKIT is reduced in both of the NASH models at the animal and cellular levels. The lipid accumulation is increased or decreased in NASH models when INKIT knockout or overexpression, which suggests INKIT is involved in the occurance of NASH. Further study shows that INKIT reduces the activity of NF-κB and inflammation in NASH model. Therefore, we propose that INKIT protects the occurrence of NASH by reducing the activity of NF-κB and inflammation. Using genetically engineered mice, lentivirus and specific kinase inhibitors, this proposal is aimed to elucidate the effect of INKIT on the regulation of NASH by NF-κB and the underlying molecular mechanism. This work will provide the novel therapeutic targets and theory evidence for prevention and cure of metabolic diseases related to NASH.

非酒精性脂肪肝炎（NASH）是众多代谢性疾病的共同病理基础，其发病机制尚未完全阐明并且临床上缺乏有效的治疗方法。我们以往的研究证实INKIT通过抑制NF-κB的活性降低炎症反应，从而负调控抗病毒天然免疫反应。由于炎症反应是诱发NASH的重要因素，因此，我们提出INKIT可能参与调控NASH的发生。我们前期的初步研究发现：INKIT在动物和细胞水平的NASH模型中表达均下调；敲除或过表达INKIT加剧或减轻NASH模型中的脂质积累，提示INKIT介导NASH发生；进一步在NASH模型里发现INKIT下调NF-κB活性和炎症反应。据此我们提出假设：INKIT通过下调NF-κB活性降低炎症反应从而保护NASH的发生。本项目拟利用基因工程小鼠、慢病毒、蛋白活性抑制剂等工具，阐明INKIT调控NF-κB在NASH发生中的关键作用及其调控机制，为NASH相关的代谢性疾病的防治提供新的治疗靶点和理论依据

非酒精性脂肪肝炎（NASH）是众多代谢性疾病的共同病理基础，其发病机制尚未完全阐明并且临床上缺乏有效的治疗方法。研究表明肝脏脂肪变性是NASH发生的第一步，且炎症反应是诱发NASH的重要驱动因素。因此，控制肝脏脂肪变性及其向NASH进展是干预此类疾病的关键节点。我们前期研究发现转录因子ZNF300在非酒精性脂肪肝发生过程中表达呈现明显的下降趋势，利用慢病毒过表达或敲低肝细胞内ZNF300能够缓解或加重肝脏脂质积累。进一步的机制研究发现脂肪肝发生过程中DNA甲基化酶介导的ZNF300甲基化修饰导致其表达下调，进而引起其靶基因PPARα转录降低，从而抑制脂肪酸氧化、加重肝脏脂肪变性发生。此外，我们发现抗病毒天然免疫调控分子INKIT（又称为C7ORF41）在动物和细胞水平的NASH模型中表达均下调，敲除或过表达INKIT加剧或减轻NASH模型中的脂质积累。进一步的研究发现INKIT能够竞争性的与IKKα/β结合，从而抑制下游NF-κB蛋白的结合、激活；在脂肪肝发生过程中c-Jun介导的INKIT表达下调促进了IKKα/β-NF-κB的结合，从而激活NF-κB和炎症反应促进了NASH的发生。总之，我们以上研究证实了DNA甲基化修饰与NAFLD发生的相关性，并阐明了在肝脏脂肪变性过程中ZNF300的作用机制以及INKIT在调控炎症反应促进NASH发生的关键作用机制，从而进一步丰富了对NAFLD发生机制的理解，为NAFLD相关的代谢性疾病的防治提供新的治疗靶点和治疗策略。此外，由于皮肤作为机体抵御外界病原体入侵的第一道防线，在维持机体免疫稳态中发挥重要作用，INKIT作为天然免疫调节分子是否在此过程中也发挥作用？我们利用人体组织芯片验证INKIT蛋白在各组织表达情况，发现随着表皮角质细胞的分化INKIT表达逐渐下降。机制研究发现INKIT能够与IKKα蛋白结合阻止IKKα进入细胞核内；而表皮发育过程中PKCα-ERK通路抑制INKIT表达，从而促进IKKα入核诱导表皮角质细胞的分化。该项研究进一步丰富了表皮发育的机制，为一些皮肤疾病的诊疗提供了理论依据。