Podoplanin在口腔癌前病变癌变过程中表达特点及作用机制的研究

近年来的研究表明，podoplanin不仅作为特异性标记物表达在淋巴管内皮细胞，也表达在一些类型癌组织包括口腔鳞状细胞癌的上皮细胞,而且这种表达与癌细胞的迁移、侵袭及转移能力增强有关。Podoplanin在口腔癌前病变癌变（突破基底膜）中的作用尚不明确。我们的前期研究显示，podoplanin在口腔癌前病变和早期癌中的表达明显增强。本项目拟采用免疫组织化学、RT-PCR、基因转染和细胞培养等技术，初步明确podoplanin在口腔癌癌前病变癌变的各个阶段中，病变上皮蛋白水平和mRNA水平表达的变化及其规律、确定podoplanin在癌前病变癌变过程中的可能作用、podoplanin表达的可能调控因素，初步明确口腔癌前病变癌变过程中podoplanin的表达与癌变细胞上皮-间充质转化的关系。为口腔癌前病变的防治提供理论基础。

近期研究表明，podoplanin不仅表达在淋巴管内皮，也表达在许多肿瘤细胞,与肿瘤细胞的迁移、侵袭及转移能力密切相关。本项目研究了人和实验动物口腔鳞状细胞癌癌前病变癌变过程中podoplanin及其相关因子的表达，探讨podoplanin在口腔黏膜癌前病变癌变中的作用。. 在口腔黏膜癌前病变至癌变的过程中，podoplanin的表达在蛋白和RNA水平随着上皮增生程度的加重而增强，在早期浸润癌达到最高。这些结果提示podoplanin表达的改变与口腔粘膜癌变有关。提示Podoplanin的高表达可能是口腔癌前病变癌变的早期标志物。. 在口腔黏膜癌的发生发展过程中，上皮细胞粘附分子E-caderin表达的下调，但病变上皮不表达N-caderin、vimentin，而且Podoplanin及与上皮间充质转化的相关因子ezrin的表达未发生明显改变。提示口腔癌前病变早期癌变未发生上皮间充质转化。目前尚未见口腔粘膜癌变过程中上皮间充质转化与Podoplanin表达改变关系的研究。. 本研究成功构建了podoplanin质粒并且对口腔鳞状细胞癌细胞系Cal27进行转染。在蛋白和mRNA水平证明转染的细胞（Cal27+PDPN）高表达podoplanin。转染细胞Cal27+PDPN的迁移能力及侵袭性增强。进一步研究见转染细胞中与细胞运动相关的细胞骨架蛋白α-tubulin、F-actin的表达增强、以及细胞骨架与细胞膜的连接蛋白ezrin和pho-ERM的表达升高。这些变化可能与转染细胞的迁移和侵袭力增强有关。目前在口腔鳞状细胞癌中经podoplanin转染后的侵袭性改变及其机制的研究尚未见报道。本研究结果对进一步阐明口腔鳞状细胞浸润和转移的机制有重要的参考价值。. 在金黄地鼠颊囊癌的模型中，在蛋白水平和mRNA水平，podoplanin在口腔癌前病变及癌变黏膜为阴性或弱阳性表达，不同病变组中无明显差异，与本研究中人口腔粘膜癌前病变及癌变的结果不相符，提示短期内化学致癌与人口腔癌的发生机制不同。. 在金黄地鼠颊囊癌的模型中，TGF-β、Ezrin、 FGF-2的表达随着上皮异常增生程度增加而加强，并且三者相互关联，可能是口腔癌发生过程中的促进因素，有利于进一步对口腔癌前病变和癌变的机制进行深入研究。