人脑胶质瘤中OPN基因剪接变异体的表达及其功能研究

骨桥蛋白(osteopontin, OPN)是一种分泌性钙结合糖磷酸化蛋白，在肿瘤的发生发展中起到了重要的促进作用。在胶质瘤组织中OPN存在多种mRNA的剪接变异体，其表达模式及功能目前仍缺乏深入研究。本研究拟通过检测临床标本中OPN不同剪接变异体的表达并结合病人资料分析OPN各剪接变异体与肿瘤病理级别及病人预后的关系，同时构建靶向OPN的慢病毒siRNA表达载体及OPN各剪接变异体的突变型慢病毒表达载体，混合导入胶质瘤细胞中，在抑制内源性总OPN基因表达的同时特异性地回复表达某一种OPN的剪接变异体，观测OPN不同剪接变异体对肿瘤细胞生长的影响，并探讨其上下游信号通路调控蛋白的表达差异，从而阐明胶质瘤中OPN各剪接变异体的表达与肿瘤病理级别及病人预后的关系，及其的功能、相应的调控机制和产生的可能原因，同时寻找基于OPN及其相关信号传导通路的人脑胶质瘤基因治疗的最优化策略。

通过完成本课题我们发现不同OPN基因剪切变体在各级别胶质瘤组织中表达水平存在差异且在胶质瘤细胞的侵袭和凋亡中的作用不同，在以OPN基因为靶点进行生物治疗时应对不同剪切变体区别对待处理。结合实验结果和已有文献报道，勾划出OPN剪接变异体家族及其相关信号通路在人胶质瘤发生发展中的作用模式， 对已有人胶质瘤发生发展机制及基因治疗策略提供补充资料。有利于胶质瘤的临床诊断和预后判断，及为基于OPN剪接变异体家族及其相关信号传导通路的人脑胶质瘤基因治疗策略的临床应用研究积累了必要经验。本课题共培养硕士研究生7人，在国内外学术期刊上发表高水平研究论文13篇，其中8篇为SCI收录杂志文章。并举办2期国家级继续教育学习班“人脑胶质瘤的基础和临床研究新进展”，参加人数300余人。完成课题预期目标。项目经费专款专用、使用合理规范。