TNFR在乳腺癌发生发展及多药耐药中的作用与机制研究

TNF is an important anti-tumor factor, which is involved in almost all the processes of tumorigenesis and plays an important role in anti-tumor immune responses. However, the study of TNFR/TNFR in breast cancer is rarely reported. Our preliminary results showed that differential expression of TNFR mRNA was significant in three different types of breast cancer cells, and the expression level was related to the apoptosis rate. The expression of TNFRSF10 was markedly increased in multidrug resistant breast cancer cells, suggesting that the TNF/TNFR may play a role in breast cancer. In this project, we will investigate the expression profile of TNFR in three different types of breast cancer cells, and clarify the role of TNFR in the occurrence and development of breast cancer. In addition, we will analyze the role of TNFR signaling pathway in multidrug resistant cancer cells, and further study the effect of " TNF+TNFR blocking" on the growth and invasion of cells in TNFR-knockdown breast cancer cell. Findings from these experiments will help to identify important functional molecules associated with breast cancer genesis and drug resistance, and clarify the role and mechanism of TNFR pathway in breast cancer and provide new ideas for breast cancer therapy. The research of TNF/TNFR in tumorigenesis and multidrug resistant is of great significance to the biotherapy for breast cancer.

TNF是重要的抗肿瘤活性因子，参与了肿瘤发生的全过程，在抗肿瘤免疫中发挥着重要作用。然而TNF/TNFR通路在乳腺癌中的研究鲜为报道。我们前期研究发现在不同类型乳腺癌细胞中TNFR表达差异显著，且TNFR的水平与细胞凋亡率相关。在多药耐药乳腺癌细胞中TNFRSF10的表达显著上升，提示TNF/TNFR信号通路在乳腺癌中具有一定作用。本项目拟将研究3种不同亚型乳腺癌细胞中TNFR表达谱差异，阐明TNFR在不同亚型乳腺癌发生发展中的作用；明确TNFR信号通路在乳腺癌多药耐药细胞模型中的作用及机制；探讨“TNF+TNFR阻断”生物联合治疗对乳腺癌细胞生长、侵袭的影响。本研究将有助于发现与乳腺癌发生和耐药相关的重要功能分子，阐明其致病和耐药的细胞分子生物学机制，为抗肿瘤药物和免疫治疗提供新思路。本项目基于前期原创性工作基础，具有重要科学价值和可能的临床转化前景。

TNF是重要的抗肿瘤活性因子，在肿瘤免疫中发挥重要作用。TNF/TNFR通路参与了多种肿瘤发生发展的全过程，在肿瘤中既有正向促进作用，也有反向抑制活性，而TNF/TNFR通路在乳腺癌中的作用鲜为报道。.项目实施过程中我们首先通过RNA-seq技术研究不同类型BC细胞耐药前后TNFR相关基因的表达谱差异，通过qRT-PCR、western blot、FACS技术进行确认，阐明BC细胞中TNF/TNFR作用；通过TNFR干扰或过表达探讨TNFR基因在乳腺癌耐药中的作用及机制；在TNFR2敲低模型中，研究“TNF+TNFR阻断”联合生物治疗策略对乳腺癌细胞生长、侵袭的影响。.研究结果发现在3种不同类型乳腺癌细胞中R1R2显著差异性表达，且TNFR的表达差异性受不同化疗药物处理的影响，尤其是三阴型乳腺癌细胞的表达与其余2种细胞表达模式差异大，可能这也是不同类型乳腺癌细胞对药物治疗敏感性差异的原因之一；细胞耐药后不同类型细胞R1R2表达影响不同，TNBC型细胞表达下调，TNF/TNFR1信号下调，抑制凋亡发生，使细胞对药物敏感性降低，这可能是导致细胞对TNF-α反应性低，耐药性产生的重要原因；敲低或过表达一种TNFR受体时，导致另一种受体表达受影响，提示TNF/TNFR信号通路在乳腺癌耐药发生中处于动态调整过程；TNFR1高表达诱导细胞凋亡，TNFR2过表达刺激细胞增殖和迁移。TNF-a刺激后TNBC细胞表面R1R2下调，TNF/TNFR通路受到抑制，可能是TNF-a临床效果降低的重要原因。采用TNF-a联合TNFR2敲低处理乳腺癌细胞后，肿瘤细胞增殖、迁移能力均下降。.本研究明确了R1R2在乳腺癌细胞中的主要功能，首次阐明TNF-a/TNFR通路在乳腺癌耐药发生中的作用与机制，提示TNF受体表达变化是细胞耐药发生的重要机制。对乳腺癌临床药物治疗奠定了基础，提供了科学思路，具有一定的临床启示。但TNF+TNFR2阻断能否作为一种肿瘤治疗策略，尚需在动物体内做进一步验证。