Hedgehog通路激活在肝内胆管癌发生发展中的作用

肝内胆管癌是第二大肝脏恶性肿瘤，其发生、发展的分子机制尚不清楚。Hedgehog信号通路与多种肿瘤的恶性表型密切相关，我们前期工作发现，在肝内胆管癌中Hedgehog信号通路明显上调。本课题拟进一步分析Hedgehog通路相关分子在肝内胆管癌组织及肝内胆管癌细胞系中的表达，用荧光素酶报告基因、病毒介导基因表达和RNA干扰等技术分析肝内胆管癌细胞中Hedgehog通路调节作用的关键点，分析关键分子对肝内胆管癌生物学特性的影响,以及将这些分子用于预后判断的可能性。以上工作有助全面揭示肝内胆管癌发生、发展的分子机制，深化对Hedgehog信号通路的认识，为寻找肝内胆管癌新治疗靶点提供线索和思路。

肝内胆管癌（Intrahepatic Cholangiocarcinoma，ICC），是来自肝内二级分支以下胆管树上皮的肿瘤。在世界范围内，ICC是仅次于肝细胞癌的第二大肝脏恶性肿瘤，约占原发性肝脏肿瘤的10%，近年来其发病率及死亡率明显上升。肝内胆管癌具有发生隐匿、恶性程度高、发展迅速、手术切除率低、临床预后差等特点，确诊后其中位生存时间不到6-9个月。ICC发病机制涉及多条信号通路，但都因缺乏有效的药物治疗靶点，导致化疗效果非常有限。因此，如何深入肝内胆管癌发病机制的研究，寻找更加有效的特异性治疗靶点成为该领域中的重大课题。. Hedgehog（Hh）信号通路在肝脏发育、细胞分化以及肿瘤发生上均起重要作用，本课题分析Hh信号通路在肝内胆管癌组织及细胞系中的表达，体内外调节Hh信号通路观察，其对肝内胆管癌细胞系生物学特性的影响，并分析Hh信号通路下游转录分子Gli1、Gli2表达水平与肝内胆管癌病人临床病理资料及预后的相关性。初步研究旁分泌在Hh信号通路调节ICC生长侵袭中的作用。. 结果发现：Hh信号通路在肝内胆管癌组织、肝内胆管癌细胞系（QBC939、RBE及HCCC-9810）中异常激活，表达量明显上调；体外实验中，分别干扰Gli1及GLi2后，ICC的生长及侵袭转移能力受到抑制。用Hh信号通路特异性抑制剂环靶明能够抑制QBC939、RBE和HCCC-9810的增殖；在体内环靶明能够明显抑制QBC939细胞种植肿瘤的大小；GLi1干扰后，ICC肿瘤在小鼠体内生长明显减弱；肝内胆管癌组织中Hh信号通路下游转录分子Gli1蛋白高表达的病人更易发生肝内转移，预后更差；肝内胆管癌组织中Hh信号通路下游转录分子Gli2蛋白高表达的病人更易发生肝内转移和血管侵犯，预后更差；多因素分析发现最大肿瘤直径、肝内转移、淋巴结转移和Gli1的表达高低与肝内胆管癌病人的预后密切相关，是独立的预后因素；ICC肿瘤细胞与间质细胞共培养后发现：间质细胞的存在，能促进肿瘤细胞的生长。但不促进肿瘤细胞的侵袭能力。. 结果表明：Hh通路在肝内胆管癌发生、发展中的关键调控分子为Gli1。并且Gli1可能为新的肝内胆管癌病人预后判断及治疗指标。