拉祜族、佤族和汉族糖代谢异常DNA模板库的建立及相关基因多态性和对应表达产物的家系研究

（1）对糖尿病前期（PD）的汉族人群行OGTT试验收集空腹和OGTT后2h静脉血并分离血浆和血细胞，血浆用来检测目的炎性因子水平和生化指标，血细胞通过流式细胞仪检测表面CCR5水平和提取DNA建立PD模板库；在前期工作基础上扩大汉族DM模板库并完成剩余拉祜族和佤族标本DNA抽提建立三个民族PD及DM的病例对照家系模板库为后续研究提供宝贵资源。（2）完成剩余拉祜族和佤族PD、DM及汉族PD人群PARL、CCR5、RANTES及SUMO4基因多态性的家系检测，比较分析不同民族间及同一民族内多态性分布的家系特征及与不同程度糖代谢紊乱的相关性,以明确这些多态性是否具家族遗传倾向为探讨糖代谢紊乱的遗传标志和分子机制提供重要线索。（3）检测PD和DM病例对照RANTES、CCR5及IP-10水平，以达到从分子水平探讨到宏观物质检测并判断与不同糖代谢紊乱的相关性，使我们的结论更具科学意义和实践指导作用。

我国DM患病率调查多数在汉族人群。项目组首次调查了拉祜族和佤族DM患病率，并收集了拉祜族和佤族外周静脉血，建立了DNA模板库，遗传因素在糖代谢异常发生中起重要作用，目前尚未见关于云南特有少数拉祜族和佤族糖尿病代谢异常相关危险因素的分子筛查，本项目利用现有宝贵资源，开展了以下四个方面的研究：①建立了云南特有的拉祜族、佤族和汉族糖尿病患者病例对照的DNA模板库，为后续研究提供宝贵资源。②在前期研究基础上完成了目的基因多态性与糖尿病及其并发症的相关性研究，并进行了不同民族间基因多态性分布的比较分析。③RANTES及其受体CCR5基因多态性、表达产物与糖尿病及其并发症的相关研究。④MCP、MIG、IP-10和IL-8与糖尿病及其并发症的相关研究。在第二方面中初步得出：拉祜族和佤族SUMO4基因163A/G多态性分布与汉族人群的分布明显不同；拉祜族与汉族PARL基因Leu262Val多态性分布明显不同，首次增加了拉祜族、佤族与汉族人群基因多态性分布的比较分析，为不同民族糖尿病发病机制的研究奠定了基础；ACACB基因rs2268388 AA基因型、高体重指数（BMI）及高腰臀比（WHR）是T2DM发生的危险因素，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)是T2DM发生的保护因素；ACACB基因rs2268388 T/T基因型及高甘油三酯(TG)是T2DM肾脏疾病发生的危险因素，填补了昆明地区汉族人群ACACB基因多态性与2型糖尿病的相关性研究资料。在第三方面中初步得出：CCR5基因启动子区59029G/A多态性可能与2型糖尿病及CCR5的表达均无关，而单核细胞和淋巴细胞表面CCR5的表达率与2型糖尿病的发生呈正相关；RANTES 基因启动子区-28C/G基因型可能与昆明地区汉族2型糖尿病的发生有关，而血浆RANTES水平可能与2型糖尿病的发生无关，首次增加了昆明汉族CCR5表达率及RANTES水平与2型糖尿病的相关研究资料。在第四方面中虽然未发现各炎性因子水平与昆明地区汉族2型糖尿病的发生有关，但MIG和IL8水平的升高可能与双下肢动脉硬化的发生有关，糖尿病病程及淋巴细胞表面CCR5的表达率可能是糖尿病视网膜病变发生的危险因素。本项目从分子水平探讨到宏观物质检测并判断与2型糖尿病及其并发症的相关性，首次填补了昆明地区汉族糖尿病及其并发症发病机制的研究资料，为糖尿病的防治提供了重要线索。