DC-SIGN介导EBV感染iDC细胞和鼻咽上皮细胞分子机制研究

EB病毒（EBV）感染与鼻咽癌密切相关。EBV能感染未成熟树突状细胞(iDC)，并且抑制其成熟和抗原提呈，从而使EBV逃避免疫。但EBV感染iDC的分子机制仍不清楚，而其机制的阐明将为控制EBV感染提供新思路。DC-SIGN是主要表达在iDC细胞上的一种凝集素，为HIV、CMV、HHV8等多种病毒的受体。我们在鼻咽上皮DC-SIGN阳性的DC细胞中检测到EBV，并首次证实DC-SIGN是EBV的新受体。但DC-SIGN结合的配体，以及DC-SIGN在介导EBV感染鼻咽上皮细胞中扮演的角色还不清楚。本课题拟利用免疫共沉淀和蛋白组技术寻找DC-SIGN与EBV结合的配体，鉴定其结合特异性；同时拟利用共培养和抗体中和阻断实验研究DC-SIGN在 EBV感染鼻咽上皮细胞中所起的作用，证实DC-SIGN介导携带EBV的iDC细胞，通过细胞-细胞接触，EBV反式感染鼻咽上皮细胞的一种新的途径。

DC-SIGN是C型凝集素，主要在未成熟的DC细胞和巨噬细胞上表达，可以与ICAM-3和ICAM-2结合，促进DC细胞和巨噬细胞与T细胞或内皮细胞粘附；可结合多种病毒的膜糖蛋白，作为病毒进入DC细胞和巨噬细胞的受体。但是DC-SIGN在EBV感染巨噬细胞和鼻咽上皮细胞中的作用不清楚。本课题通过对DC-SIGN启动子序列测序发现DC-SIGN的 -139GG和-939AA基因型与鼻咽癌（NPC）密切相关。体外EBV感染巨噬细胞THP-1，可促进M2型巨噬细胞标志物和细胞因子的表达，及显著上调DC-SIGN和 IL-6的表达；并且通过激活JAK/STAT和NFκB信号通路，上调免疫抑制酶吲哚胺2,3双加氧酶1（IDO1）的表达，产生抑制T细胞增殖和细胞毒作用的微环境。另外，感染EBV上调THP-1膜上DC-SIGN的表达可以结合鼻咽上皮细胞N5膜上的ICAM-2，促进携带EBV的THP-1细胞反式感染N5细胞。