基于构效关系和谱效关系联合研究龙眼叶抗2型糖尿病药效物质基础

The leaf of Dimocarpus longan Lour had hypoglycemic effect. Preview research from this project group have show that the n-butyl alcohol and 95% alcohol extracts of the leaf of Dimocarpus longan Lour could decrease blood glucose in diabetes mice. But its effective substance and hypoglycemic mechanism are still not clear. In this study, with the leaf of Dimocarpus longan Lour in different areas as studying object, by establish mouse model of type 2 diabetes (mouse were fed with high glucose and high fat diet, then injection with a small dose streptozotocin ), with the indicators of blood glucose, glucose tolerance and serum insulin combined with anti-diabetes activity in vitro. Research on active composition and structure-activity relationship in leaf of Dimocarpus longan Lour by the modern isolation and analytical techniques. Meanwhile, this project carries out pharmacochemical study of the extracts and serum containing as well as techniques and methods of chemistry of Chinese materia, pharmacology of Chinese materia medica and serum pharmacochemistry, establishes HPLC fingerprints, and analyzes spectrum-effect relationship by Pearson correlation analysis and grey correlation analysis to study relationship between chromatography fingerprint and anti-diabetes activity of the extracts in leaf of Dimocarpus longan Lour, comfire the active ingredients of effective extract in the serum of experimental animals. The research aims to clear the relationship beteen chemical composition, compound structure, compatibility, fingerprints, constituents dissolved in serum and anti-diabetes activity. Study on chemical composition, tructure-activity and spectrum-effect relationship in anti-diabetes. The research illuminate the anti-diabetes activity and effective substance in general and scientific from leaf of Dimocarpus longan Lour, which may provide the scientific basis for the new medicine with the function of anti-diabetes.

龙眼叶具有降血糖作用，前期研究证实，龙眼叶的正丁醇和95%乙醇提取物能降低糖尿病动物模型的空腹血糖，但其发挥降血糖作用的物质基础及作用机制仍不清楚。本项目以不同产地龙眼叶为研究对象，通过高糖高脂结合链脲佐菌素致2型糖尿病小鼠模型，以血糖、糖耐量、血清胰岛素等指标和体外降糖活性的方法，采用现代分离分析手段，研究龙眼叶抗糖尿病的活性组分和构效关系；并运用中药化学、中药药理学和血清药物化学技术和方法，对龙眼叶提取物及含药血清进行药物化学研究，建立指纹图谱，采用相关分析和灰关联度分析方法研究提取物的药效指标与指纹图谱的谱效关系，并分析确定血清中移行成分以探明其体内作用物质。项目旨在弄清单体成分、化合物结构、配伍、指纹图谱以及入血成分与抗糖尿病药效之间关系，完成龙眼叶中抗糖尿病化学成分、构效关系和谱效关系研究，从整体上科学地阐明龙眼叶药材抗糖尿病作用及其物质基础，为开发新的抗糖尿病药物提供科学依据。

前期研究证实，龙眼叶的提取物能降低糖尿病动物模型空腹血糖，但其发挥降血糖作用的物质基础及作用机制仍不清楚。本项目以龙眼叶为研究对象，通过高糖高脂结合链脲佐菌素致2型糖尿病小鼠模型，以血糖、糖耐量、血清胰岛素等指标和体外降糖活性的方法，明确了龙眼叶抗2型糖尿病的药理作用，阐明其作用机制可能与修复胰岛细胞损伤、降低炎症因子水平及抗脂质过氧化过程有关。采用现代分离分析手段，从龙眼叶中分离鉴定11个化合物，其中没食子酸乙酯、山柰酚、木犀草素、槲皮素、紫云英苷、羽扇豆醇对α-葡萄糖苷酶具有良好的抑制活性；通过单体化合物配伍与抗糖尿病活性关系研究，发现化学成分两两和三三配伍后对α-葡萄糖苷酶抑制活性提高，C环上C3位的取代基种类和数目可能影响黄酮类化合物抑制α-葡萄糖苷酶活性，完成构效关系研究。运用中药化学指纹图谱及中药血清药物化学技术和方法，对龙眼叶提取物及含药血清进行药物化学研究，建立HPLC指纹图谱。采用灰色关联度分析和Pearson相关分析法，研究龙眼叶清除DPPH自由基、抑制α-葡萄糖苷酶活性作用与HPLC色谱峰之间的相关性，明确了龙眼叶具有抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶活性作用是多种成分共同作用的结果，完成谱效关系研究。通过血清药物化学的研究方法，采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术，从含药血清中初步鉴定了龙眼叶在大鼠血中原型成分及代谢成分，共鉴定17个药源性成分，探明其体内作用物质，初步确定了没食子乙酯、槲皮素、槲皮苷、木犀草素等成分可能为龙眼叶降血糖活性的物质基础。建立UPLC/HPLC一测多评法测定龙眼叶中5种成分含量，采用Box-Behnken响应面法、多指标加权综合评分法优选龙眼叶提取工艺，科学地评价龙眼叶质量。. 本项目通过弄清龙眼叶单体化学成分、化合物结构、配伍、指纹图谱以及入血成分与抗糖尿病药效之间关系，完成龙眼叶抗糖尿病化学成分、构效关系和谱效关系研究，从而从整体上科学地评价龙眼叶抗糖尿病作用及其物质基础。项目为抗糖尿病新药研究提供实验基础。对促进中医药研究方法的进步和现代化，促进地方经济发展有重要意义。