端粒酶的激活是肿瘤细胞区别于正常细胞的重要标志,抑制端粒酶的激活能有效地抑制肿瘤的发生发展。自然产物中存在端粒酶抑制剂的可能性比人工合成的化合物更大,但目前可用于筛选的TRAP法特异性不强,而且不适合微生物代谢产物的筛选。本课题将不同片断的人端粒酶逆转录酶(hTERT)与Gal4-AD重组构成融合表达载体,将克隆了MS2发夹结构的全长人端粒酶RNA(hTR)插入pIIIEx426质粒,共转染L40coat酵母菌,利用该菌基因组中LexA-MS2和报告基因建立RNA酵母三杂交系统,筛选hTERT-hTR结合最佳克隆作为端粒酶高通量抑制剂筛选模型,对2000多株放线菌代谢产物进行筛选和有效成分的分离和活性鉴定,不仅为阐明hTERT与hTR的结合方式提供了更精确的方法,而且为筛选端粒酶抑制剂提供了特异、高效、可用于微生物代谢产物的高通量筛选模型,并有望从中筛选到新的、特异的端粒酶抑制剂。
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数据更新时间:2023-05-31
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