基于细胞色素P450酶系统调控的延胡索药对配伍机制研究

本课题采取人CYP450酶体系和大鼠肝微粒体孵育技术两种体外实验方法（选取CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4作为主要药物代谢酶）和Beagle犬CYP450酶体内系统,选取中医经典药对延胡索-川芎作为活血行气止痛代表配伍药对，采用HPLC法分别测定孵育液或血浆中主要成分延胡索乙素、川芎嗪的代谢量和CYP450酶特异性底物代谢产物含量，探索延胡索-川芎配伍前后药物代谢变化和对CYP450酶活性的影响。综合分析延胡索-川芎配伍前后主要成分的代谢变化和CYP450酶活性的变化，找出此活血行气止痛的配伍可能存在的代谢机制，阐述中药的配伍规律，从一个全新的角度构建中药的配伍研究模式。

本课题采用人CYP450酶体系和大鼠肝微粒体孵育体系两种体外实验方法和Beagle犬体内CYP450酶代谢体系，研究中医经典药对延胡索-川芎配伍机制。研究结果显示，所采用人6种P450酶（CYP1A2、CYP2D6、CYPA4、CYP2C9、CYP2C19、CYP2E1）均不同程度的参与了延胡索乙素和川芎嗪的体外代谢过程，二药配伍后，对CYP2D6﹑CYP2E1、CYP3A4酶介导的药物代谢均有较为显著的影响，且该作用随着孵育时间的延长和药物浓度的增大而增强。反过来，延胡索和川芎均抑制CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4、CYP2E1酶的活性，而二药配伍后，显著增加单味药对CYP1A2、CYP2D6、CYP2E1酶的抑制作用。在大鼠微粒体孵育体系中，延胡索和川芎配伍后，对两味单味药的代谢均无显著影响，但对CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4、CYP2E1酶的代谢均显著影响。Beagle犬体内代谢体系中，延胡索和川芎配伍后，单次给药可抑制CYP2D6酶的活性，而多次给药与延胡索单独使用比较，则对促进CYP2D6酶的代谢。结果提示，延胡索和川芎配伍，对两味单味药及合用的P450酶底物药物的代谢均有可能产生影响，其中CYP2D6酶可能起到关键性作用。这一结果也从代谢的角度上解释了延胡索-川芎配伍产生协同作用的部分机制，为中医配伍研究提供了一种新的思路。