旋毛虫不同发育时期特异性抗原对炎症性肠病的免疫调节作用研究

本研究基于旋毛虫感染宿主所引发的Th2型免疫反应可以抑制炎症性肠病中Th1型为主的过度免疫反应的设想，在前期实验已证实活体肠道线虫旋毛虫从调节肠道免疫的角度对Th1型免疫反应为主的炎症性肠病有良好干预作用的基础上，将进一步寻找旋毛虫有效抗原，探讨将其作为一种安全有效的生物免疫调节剂防治炎症性肠病的可能。通过旋毛虫不同发育时期特异性抗原对三硝基苯磺酸诱导的炎症性肠病小鼠模型进行对比干预，利用分子生物学与免疫学技术检测其对模型小鼠疾病活动指数、炎症指标、病理改变以及代表Th1、Th2、Th17、Treg型免疫反应的细胞因子的影响，从分子、蛋白和细胞水平、肠道局部免疫和全身免疫水平观察干预效果并探讨可能的干预机制。筛选获得具有强免疫调节效应的抗原成份待进一步研究，为最终开发出一种防治炎症性肠病的理想的无毒高效的生态制剂奠定基础。

基于旋毛虫(T. Spiralis)感染宿主所引发的Th2型免疫反应可以抑制炎症性肠病(IBD)中以Th1型为主的过度免疫反应的设想，在前期实验已证实活体肠道线虫旋毛虫从调节肠道免疫的角度对Th1型免疫反应为主的炎症性肠病有良好干预作用的基础上，应用旋毛虫不同发育时期特异性抗原对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的IBD小鼠模型进行对比干预，利用分子生物学与免疫学技术检测其对模型小鼠疾病活动指数、炎症指标、病理改变以及代表Th1、Th2、Th17、Treg型免疫反应的细胞因子的影响，从分子、蛋白和细胞水平、肠道局部免疫和全身免疫水平观察干预效果并探讨可能的干预机制。结果表明，成功分离和纯化的旋毛虫不同发育时期抗原基因pET-22b-T668、pET-22b-ZH68、pET-22b-WM5和pET-22b-WN10重组蛋白，经Western-Blot鉴定证明表达产物具有良好反应原性。旋毛虫有效抗原成分ZH68和T668基因表达的可溶性蛋白免疫后TNBS诱导肠炎模型组与盐水注射后造模组相比耐受化学诱导剂强。表现出对TNBS诱导结肠炎的良好的治疗作用。WM5和WN10基因表达的可溶性蛋白对肠炎的干预效果较差，两组蛋白之间差异显著。其可能的机制是：有效抗原成分恢复TNBS模型鼠Th1/Th2正常的平衡；抑制了机体的过度免疫反应和免疫细胞和细胞因子发挥超强的免疫调剂作用，从而使机体免疫失衡恢复到正常水平。