急性肝衰竭小鼠肝细胞内质网应激及其对肝细胞生长信号传递影响的研究

急性或慢加急性肝衰竭患者死亡率高的一个主要原因是存在肝再生障碍，但肝再生障碍的详细机制目前没有阐明。临床上广泛使用促肝细胞生长因子（HGF）治疗肝衰竭疗效有限，我们在前期研究中发现肝衰竭患者血浆抑制肝细胞增殖，而且表皮生长因子（EGF）不能逆转其抑制作用，提示肝衰竭患者肝再生障碍可能与残留肝细胞增殖信号受体表达和信号传递障碍有关。既往研究提示急性肝衰竭小鼠残留肝细胞存在内质网应激反应。本研究中我们拟观察急性肝衰竭小鼠肝细胞三条主要内质网应激反应通路变化规律及与HGF、EGF受体表达、肝细胞增殖的相关性，然后体外探讨肝细胞内质网应激反应对促肝细胞增殖信号EGF、HGF等受体表达及信号传递的影响、并进一步探讨前列腺素E1（PGE1）在减轻肝细胞内质网应激反应、促进肝细胞增殖中的作用。为明确肝衰竭患者肝再生障碍的机制提供理论依据并为提高肝衰竭患者肝再生能力提供新的手段。

急性或慢加急性肝衰竭患者死亡率高的一个主要原因是存在肝再生障碍，但肝再生障碍的机制目前没有阐明。既往的研究提示肝衰竭患者肝再生障碍可能与残留肝细胞增殖信号受体表达和信号传递障碍有关。本研究中我们假设急性肝衰竭（acute liver failure, ALF）小鼠残留肝细胞处于持续内质网应激反应（ER stress），持续ER stress损伤肝细胞增殖能力，是其肝再生障碍的主要原因。我们的研究发现ALF小鼠肝细胞存在持续ER stress、促肝细胞生长素（Hepatocyte Growth Factor, HGF）受体表达下降及肝细胞增殖障碍。在体外发现肝细胞ER stress 抑制肝细胞增殖，并降低HGF受体c-met表达，初步证实了持续ER stress 是肝衰竭肝再生障碍的一个重要原因。然后，我们探讨了前列腺素E1(PGE1)在ER stress诱导的肝细胞凋亡中的作用，我们发现PGE1能有效阻止ER stress诱导剂毒胡萝卜素（thapsigargin，TG）介导的肝细胞凋亡，PGE1显著诱导GRP78表达，但抑制蛋白激酶样内质网激酶（Phosphorylation-PKR like ER kinase，p-PERK）、真核起始因子2α（Phosphorylation-eukaryotic initiation factor 2α，p-eIF2α）的磷酸化及C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein, CHOP）的表达。PGE1对GRP78的诱导作用及肝细胞凋亡的保护作用可以被环磷腺苷依赖蛋白激酶A（protein kinase A，PKA）通路阻断剂H89阻断，进一步用siRNA阻断GRP78表达后PGE1也失去对肝细胞凋亡的保护作用，结果证实了PGE1通过PKA依赖通路上调GRP78表达阻止ER stress介导的肝细胞凋亡。这些结果发现了PGE1保护肝细胞凋亡的新的机制。