卵巢低级别浆液性癌输卵管起源的分子机制研究

Low grade serous ovarian cancer(LG-SC) is thought to be derived from Ovarian Surface Epithelia（OSE）. Based on pathological and immunohistochemical studies of ovarian normal tissues and serous tumor tissues, we proposed that the "ovarian" LG-SC is likely to be derived from oviduct（fallopian tube）epithiliam.Tubal epithelia are able to stuck on ovarian surface invaginate into the ovarian stroma to form ovarian epithelial inclusions (OEIs).Serous tumors including serous cystadenoma, serous borderline tumor, and LG-SC develop afterwards. In this study, Calibrant's Gemini? platform was used for proteomics analysis on OSE,OEI,benign,bordline and cancerous tissues isolated by Laser capture microdissection (LCM).The first aim of this study is to confirm the oviduct origin of LG-SC by proteomics analysis. Then we chose RID1A, 53BP1and HRAS(Dysregulated in LG-SC) to study their roles in tumorigenesis and progression. At last we will use immunohistochemical analysis to test the correlation between these protein expression and tumor progression or overall survival.This study will clarify the origin and progression of LG-SC and identify tumor markers for early diagnosis and molecular treatment.

传统观点一直认为卵巢低级别浆液性癌与其他上皮性卵巢癌一样起源于卵巢表面上皮。我们在近期工作基础上提出卵巢低级别浆液性癌起源于输卵管的假说：输卵管上皮细胞脱落→附着到卵巢表面→输卵管源包涵体→卵巢浆液性囊腺瘤→卵巢交界性浆液性肿瘤→卵巢低级别浆液性癌。本研究用激光捕获显微切割技术获取输卵管上皮、卵巢表面上皮、包涵体、浆液性囊腺瘤、交界性浆液性肿瘤、低级别浆液性癌组织，利用Gemini蛋白组学系统进行蛋白表达谱分析；分析各种组织的表达谱验证卵巢低级别浆液性癌起源于输卵管的假说；筛选可能导致卵巢低级别浆液性癌发生发展的关键分子如RID1A、53BP1和HRAS，并利用体外、体内实验分析它们在低级别浆液性癌发生发展过程中的作用；免疫组化分析RID1A、53BP1和HRAS与肿瘤发生发展和临床预后的相关性。本研究将为明确卵巢低级别浆液性癌的起源提供分子水平的证据，为肿瘤标志物的筛选和诊断提供依据。

传统观点一直认为低级别浆液性卵巢癌与其他上皮性卵巢癌一样起源于卵巢表面上皮。近期的研究表明高级别浆液性卵巢癌主要起源于输卵管伞上皮，同时我们前期研究从病理及组织形态学上揭示卵巢低级别浆液性癌起源于输卵管伞分泌细胞。本课题拟在此基础上验证高级别浆液性卵巢癌的输卵管起源并进一步探索低级别浆液性卵巢癌起源于输卵管的分子证据，同时筛选能有效区分高低级别浆液性卵巢癌的分子标记。本研究通过转录组测序技术检测输卵管上皮（FTE）（5例）、卵巢表面上皮(OSE)（4例）、人腹膜上皮（HPM）（4例）、浆液性交界性卵巢肿瘤(SBT)（6例）、低级别浆液性卵巢癌（LGSOC）（6例）和高级别浆液性卵巢癌（HGSOC）（5例）mRNA的表达水平，六组样本差异表达基因分层聚类分析显示SBT、LGSOC和HGSOC基因表达模式均与FTE更相近，通过非参数秩和检验以P<0.005为截断选取三组正常组织差异表达基因536个，进一步通过非监督聚类分析、秩和分析及皮尔森检验明确了LGSOC分子表达模式与FTE更相近且相关性最大。RT-PCR验证测序结果并筛选FTE和OSE中差异表达基因，进一步免疫组化验证差异表达基因在LGSOC、FTE和OSE组织中的表达量及表达模式，发现其在LGSOC中的表达量及模式与FTE一致，充分证明了低级别浆液性卵巢癌起源于输卵管的观点。另外，课题组验证并筛选高低级别浆液性卵巢癌中差异表达基因，发现AGR3在两者中具有明显差异，免疫组化联合TP53和AGR3明显提高高低级别浆液性卵巢癌诊断的准确性，可用于临床有效区分高低级别浆液性癌，指导后期临床治疗。本课题从分子水平证实低级别浆液性卵巢癌起源于输卵管，为其早期诊断及发生机制的研究奠定坚实基础。