乳香－没药对药协同增效及其分子机制研究

基于乳香-没药对药协同增效的临床实践经验与现代研究积累，以痛经为切入点，针对抗炎镇痛活性开展其协同增效物质基础及其分子机制研究。提出：乳香-没药对药配伍协同增效是通过效应成分（群）间产生的协同/加合性以及提高其生物利用度等因素实现的工作假说。工作路径是：（1）应用现代分离分析手段及生物效应评价方法研究乳香-没药对药的配伍效应与效应成分（群）；（2）应用定量药理学方法评价两药间协同增效作用；（3）从细胞、分子及酶水平研究效应成分（群）的抗炎镇痛机理，阐明协同增效的分子机制。从而为揭示乳香-没药对药相须配伍理论的科学内涵，为研制创新药物提供科学依据。

本项目基于对乳香-没药对药协同增效的临床实践、配伍取效特点及现代研究基础，以活血化瘀止痛功效为研究切入点，针对药对显著的抗炎镇痛活性开展两药配伍协同增效作用及其分子机制。项目主要完成研究工作及阶段性成果如下：. 1. 以乳香、没药中的挥发性成分和非挥发性成分为评价指标，研究了不同收集地来源的乳香、没药药材的质量，为药材质量控制提供了参考，为乳香-没药的配伍效应与物质基础研究提供了依据和指引。. 2. 对乳香、没药中的化学成分进行了较为系统的研究，获得了三萜酸类、二萜类、倍半萜类等单体化合物20余个，为两药配伍效应物质基础研究提供了支撑。. 3. 以抗炎镇痛、活血化瘀效应指标群为评价体系，研究了乳香、没药配伍前后及各化学部位的生物效应变化，研究结果表明两药配伍对不同评价指标表现出协同、相加、拮抗的作用，为深入探讨其分子机制提供了依据。. 4. 采用UPLC-QTOFMS方法对乳香-没药配伍前后非挥发性成分的溶出变化进行研究，并采用PCA分析获得配伍前后的差异性成分，进一步探讨了差异性成分的对LPS-诱导的巨噬细胞产生NO的影响。同时，分析了乳没配伍前后其水煎液的理化参数变化与化学成分变化之间的相关性，为深入探讨汤液作用特点与分子机制提供实验数据。. 5. 采用GC-MS技术对乳香-没药配伍前后挥发性成分的变化进行了研究，结果表明两药配伍后的挥发性成分的种类组成及相对含量发生变化，并对乳没不同比例配伍前后挥发性成分的变化进行了GC-MS分析及效应评价，结果表明两药配伍后的化学成分变化与抗血小板聚集、抗凝血酶活性的相关性。. 6. 从巨噬细胞、卵巢颗粒细胞、血小板聚集、凝血酶活性等细胞、分子水平探讨了乳香、没药配伍前后协同增效、拮抗作用及其分子机制，从而为两药临床相须为用配伍机理和科学内涵提供了科学依据。. 研究工作在国内外学术期刊发表论文19篇，其中SCI收录8篇；待发表论文3篇；获得授权发明专利1项；培养硕士研究生3名。