长链非编码RNA-DKFZP434K028影响乳腺癌侵袭转移的分子机制研究

Long non-coding RNAs (LncRNAs) can play an importantly regulatory role in tumor invasion and metastasis through a variety of ways. The localization of LncRNAs determines the mechanism of regulating invasion and metastasis. Our results showed LncRNA-DKFZP434K028 mainly localizes in the cytoplasm of breast cancer cells and can promote the invasion and metastasis of breast cancer. LncRNA-DKFZP434K028 has the binding sites for miR-185. MiR-185 can negatively regulate the receptor for advanced glycation end products (RAGE) and influence the invasion and metastasis of breast cancer. However, the molecular mechanism of LncRNA-DKFZP434K028 in invasion and metastasis of breast cancer remains unclear. This study explores the molecular mechanism of LncRNA-DKFZP434K028 in the invasion and metastasis of breast cancer by the method of combination of cell, animal experiments and clinical tissues. This study also elucidates whether the LncRNA-DKFZP434K028 is targeted to bind miR-185 and whether LncRNA-DKFZP434K028 affects the epithelial-mesenchymal transition (EMT), synthesis of matrix metalloproteinase (MMP) and F-actin polymerization in breast cancer cells. Thus, this study will provide a new target for clinical judging of the prognosis and inhibiting the invasion and metastasis of breast cancer.

长链非编码 RNAs（LncRNAs）通过多种方式在肿瘤侵袭转移中发挥重要的调控功能。LncRNAs的定位决定了其调控侵袭转移的机制。我们前期研究显示主要定位于细胞质的LncRNA-DKFZP434K028能促进乳腺癌的侵袭转移，且存在miRNA-185的结合位点，而miR-185可负向调控高级糖基化终末产物受体（RAGE）影响乳腺癌的侵袭和转移，但LncRNA-DKFZP434K028促进乳腺癌侵袭转移的分子机制尚不清楚。本项目拟采用细胞、动物实验及临床样本相结合的方法，探讨LncRNA-DKFZP434K028与RAGE竞争性结合miR-185，影响乳腺癌细胞的上皮间质转化（EMT）、基质金属蛋白酶（MMP）的合成及F-actin聚合与解聚合，以揭示LncRNA-DKFZP434K028影响乳腺癌侵袭转移的分子机制，为临床判断乳腺癌患者的预后及抑制乳腺癌的侵袭和转移提供新的靶点。

长链非编码RNA（Long chain non coding RNA，LncRNA）不具有蛋白质编码功能，但能以RNA形式在表观遗传学，转录及转录后等多种层面调控基因的表达，而且在肿瘤侵袭转移中发挥重要的调控功能。LncRNAs的定位决定了其调控侵袭转移的机制。本研究发现LncRNA-DKFZP434K028在乳腺癌细胞和组织中表达升高，敲低LncRNA-DKFZP434K028后乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖、趋化运动、迁移、侵袭能力明显下降。LncRNA-DKFZP434K028可以通过影响F-actin聚合从而影响乳腺癌的侵袭和转移。并发现LncRNA-DKFZP434K028可以以内源竞争RNA（Competing endogenous RNA，ceRNA）模式与RAGE 竞争性结合miR-185影响PI3K/Akt/GSK3β/Snail信号通路促进细胞的上皮-间质转化（Epithelial-mesenchymal transition, EMT）从而影响乳腺癌细胞的侵袭和转移。同时我们还新发现同是LncRNA的另外两个基因Linc00426和LncRNA-ZEB2-AS1通过不同的分子机制影响乳腺癌和肺腺癌（Lung adenocarcinoma，LUAD）的侵袭和转移。运用生物信息学的相关分析筛选了一些与乳腺癌和LUAD有密切关系的miRNA，通过预测软件预测了能与这些miRNA结合的蛋白，而后对miRNA有可能结合的蛋白进行GO 和KEGG分析，并用实验证实了这些miRNA及蛋白对乳腺癌和LUAD功能的影响，为临床预防乳腺癌和LUAD的侵袭和转移提供理论和实验依据，争取能找出抑制乳腺癌和LUAD侵袭转移的靶向基因，为乳腺癌和LUAD的靶向基因治疗提供依据。