基于microRNA芯片技术的银屑病关节炎及其证候血清标志物筛选与验证

Psoriatic arthritis (PsA) can lead to joints damage, with a high disability rate. The early diagnosis and treatment are the best methods for preventing PsA disease process and improveing PsA prognosis. However, there is no specific biomarkers for prediction and early diagnosis of PsA, which is the bottleneck for effective control of this disease. MicroRNA is able to regulate the expression of genes, and thus can be the perfect biomarkers for prediction of disease progression. This project intends to perform the following studies: 1) Screening out the early diagnosis biomarkers by the study on serum specific microRNA in Chinese population; 2) Exploring the early predictive microRNA biomarkers through detecting the serum samples of PsA patients, premorbid samples as well as the dynamic acquisition samples from psoriasis vulgaris to PsA；3）dertermination of the discriminating cold syndromes from hot syndrome using the serum microRNA biomarkers tested. This study will provide the biomarkders for the early prediction, early diagnosis and early intervention of PsA, and it is also helpful for the standardization of syndrome differentiation for Chinese medicine.

银屑病关节炎(psoriatic arthritis, PsA)致残率高、危害大，早期预测和诊断是阻止其进程、改善预后最有效的方法。但是，目前临床上没有成熟的生物标志物可用于PsA的早期预测和诊断，已成为有效控制其发生发展的瓶颈。MicroRNA调控基因的表达，是用于疾病进程预测的理想生物标志物。本项目将在前期研究的基础上进一步开展以下研究：1)对中国人群PsA患者的血清microRNA特异性生物标志物进行研究，筛选出早期诊断的生物标志物；2)通过对银屑病进展到PsA前后的血清样本的动态采集并进行microRNA表达谱研究，筛选早期预测的microRNA生物标志物；3)依据中医对PsA寒热证型的分类，探讨PsA寒热辨证与血清microRNA生物标志物的关系。本项目将对PsA的早期诊断、预测和早期干预提供生物学依据，并将为中医辨证分型的规范化奠定基础，具有重要的科学意义和临床价值。

银屑病关节炎（psoriatic arthritis）是银屑病最常见的继发性疾病，致残率高，且无法治愈，早期中西医结合治疗在提高PsA治疗有效率及稳定病情方面具有一定的优势。但是至今尚无PsA早期筛查和早期诊断的特异性指标，且目前PsA临床分型繁多，辨证标准不一，缺少对其中医证候特点的研究，在证候规范化方面的研究更是少见，严重制约中医特色优势的发挥。为探索有利于PsA早期筛查和早期诊断的生物标志物，提高PsA辨证的准确性、规范性和客观性，本项目首先采用第二代高通量测序技术构建中国人群PsA和寻常型银屑病、类风湿关节炎、痛风性关节炎以及健康体检者血浆外泌体microRNA表达谱，通过生物信息学分析寻找候选的PsA特异性microRNAs，然后利用RT-PCR技术及ROC曲线对候选的特异性microRNA进行验证。研究结果提示miR-30d-5p、miR-432-5p可能是PsA的特异性生物标志物，其组成的表达谱可能有利于PsA的早期诊断。同时，对寻常型银屑病患者进行每6个月的追踪随访，直至发生PsA。描绘从寻常型银屑病发展至PsA的血浆外泌体microRNA动态表达图谱，并应用生物信息学分析和RT-PCR技术筛选并验证出let-7d-5p可能是PsA早期筛查的生物标志物。最后对PsA患者进行寒热辨证，比较PsA寒证和热证的microRNA表达特征和差异性表达的microRNA，发现miR-126-5p在PsA热证和寒证中具有表达差异性，可能可以作为PsA寒热辨证的生物标志物。基于本课题研究成果，对后续寻找PsA的筛查和早期诊断方法、辨证论治规范化方法具有一定的指导意义，为进一步研发PsA的预测诊断、辨证分型试剂盒奠定了基础。