miR-124介导的小胶质细胞激活在电针调节创伤应激大鼠免疫功能中的作用及其调控机制

A large number of clinical and laboratory data indicate that acupuncture could modulate the immune system. However, the mechanisms especially the role of the central nervous system (CNS) undelying the immunoregulatory effect of acupuncture are still unknown. Microglia is one of the important components in the CNS. In recent years, scientists pay close attention to the role of microglia in the process of disease development. It's revealed that microglia could be activated when body comfront stress, but the exactly subsequent event after microglia activation was still not yet clear. The role of microglia activation in the immunoregulatory effect of electroacupuncture need to be elucidated. MicroRNA is belonging to a class of evolutionarily conserved small RNA molecules found in recent years. It has been showed that the central-specific expressed miR-124 mediated the activation of microglia under pathological conditions. In the present study, we intend to use the morphological combination percoll method to isolate microglia cells from different stress-related brain areas in vivo and in ex vivo, to analysis the role of miR-124-mediated microglial activation in the immunoregulatory effect of electroacupuncte on traumatic rats. The study not only illustrates the central mechanisms of immunoregulatory effect of acupuncture from a new perspective, but also provides a new experimental basis for clinical application of acupuncture to regulate the immune-mediated disorder.

许多临床实践和实验研究表明，针刺对机体的免疫系统具有明显调节作用，然而针刺调节免疫系统功能的机理研究尤其是中枢机理有待深入阐明。小胶质细胞是中枢神经系统的重要组成部分，近年来小胶质细胞在疾病发生发展过程中的作用受到科学家的密切关注。有研究显示小胶质细胞在多种应激源作用下被激活，然而小胶质细胞的激活在创伤应激后免疫紊乱中的作用尚未明确，与电针调控创伤后免疫紊乱中的作用的关系更属未知。MicroRNA 是近年来发现的一类进化保守的小分子RNA，有证据表明中枢特异性表达的miR-124介导了病理状态下小胶质细胞的激活。本课题中，我们拟采用形态学方法结合percoll法在体分离应激相关脑区的小胶质细胞，分析miR-124介导的小胶质细胞激活在电针调整创伤应激大鼠免疫功能中的作用及其调控机制，从新的视角阐释电针调节免疫的中枢机制，也为临床推广应用针灸调节免疫功能提供了新的实验依据。

针刺可调节机体的免疫功能，然而针刺调节免疫系统功能的机理研究尤其是中枢机理尚不明确。小胶质细胞是中枢神经系统的重要组成部分，近年来小胶质细胞在疾病发生发展过程中的作用受到科学家的密切关注。有研究显示小胶质细胞在多种应激源作用下被激活，然而小胶质细胞的激活在创伤应激后免疫紊乱中的作用尚未明确，与电针调控创伤后免疫紊乱中的关系更属未知。MicroRNA 是近年来发现的一类进化保守的小分子RNA，有证据表明中枢特异性表达的miR-124介导了病理状态下小胶质细胞的激活。本课题中，我们采用形态学方法结合percoll法在体分离应激相关脑区的小胶质细胞，分析miR-124介导的小胶质细胞激活在电针调整创伤应激大鼠免疫功能中的作用及其调控机制，从全新的角度探讨针刺调节手术后免疫功能的中枢机理。实验结果表明：1、急性创伤应激后中枢小胶质细胞的活化介导了术后外周免疫功能的改变。中枢下丘脑、前额叶皮层区域的小胶质细胞在手术创伤后12小时有较为显著激活，手术后24小时达到峰值，术后第3天仍有部分激活，术后第7天基本恢复至正常水平。小胶质细胞的激活和免疫功能的降低有显著相关性。给予大鼠小胶质细胞功能性抑制剂能部分拮抗创伤引起的免疫功能紊乱。表明中枢小胶质细胞部分介导了手术后免疫功能改变；2、电针通过抑制小胶质细胞的活化来发挥调节免疫的效应。手术后即刻给予大鼠电针能显著抑制小胶质细胞的激活，抑制小胶质细胞TLR2/4以及炎性细胞因子的表达等。电针抑制小胶质细胞激活和其调节免疫效应相关；3、miR-124-VAMP3通路介导了中枢小胶质细胞的活化。外周创伤后下丘脑小胶质细胞miR-124的表达降低，离体激活的小胶质细胞中miR-124表达下降；小胶质细胞内miR-124可通过调节其靶基因VAMP3来减少促炎细胞因子的释放；电针可通过调控miR-124-VAMP3通路抑制小胶质细胞功能活动，从而减轻创伤后的神经炎症。本项目在以往开展针刺研究的基础上，深入系统地研究了中枢小胶质细胞在电针调节手术创伤后免疫功能异常中的作用及其中枢调节机理，为全面了解小胶质细胞的生理病理功能提供了新的思路。