Cx43不依赖CJIC抑制肺癌细胞生长的作用靶点及信号通路研究

Connexin(Cx)是构建细胞间隙连接的主要蛋白质，其通过建立细胞间隙连接通讯(GJIC)参与细胞周期调控，在细胞生长、分化和抑制恶变过程中发挥作用。我们前期研究表明：肺癌细胞转染Cx43基因后，有些细胞系形成了细胞间隙连接通讯，而有些细胞系未形成，但两种情况都抑制了肺癌细胞生长，故Cx43蛋白尚存在不依赖细胞间隙连接通讯抑制细胞增殖的作用机制。为探讨Cx43蛋白的调控机制，本项目拟采用免疫共沉淀结合串联质谱技术研究Cx43蛋白在细胞内参与细胞周期调控的作用靶点；拟采用基因转染及基因沉默技术，转染低表达或沉默高表达Cx43肺癌细胞的Cx43基因表达，并应用Real Time PCR、Western blot等技术检测基因转染及基因沉默前后Akt/p70S6K通路蛋白Akt、mTOR、p70S6K等基因及蛋白的表达，以探讨Cx43蛋白的抑癌机制是否与Akt/p70S6K信号传导通路有关。