HCV感染诱导的microRNA-224促进肝细胞癌形成的机制研究

Hepatitis C virus (HCV) infection induces chronic hepatic inflammation, which usually favors the initiation and progression of cancer. It is also increasing clearly that microRNA plays an important role in regulating both inflammation and tumorigenesis. However, little is known about whether and how microRNA provides the link between inflammation and cancer.In the preliminary study, we found that microRNA-224 expression levels were upregulated in hepatitis C patients, and microRNAs-224 overexpression in primary hepatocytes and liver cancer promoted cell proliferation，and miRNA-224 potentially　regulated GSK3beta and CK1 in the Wnt signaling pathway. On this basis, we plan to further analysis the correlation of hepatitis C with microRNA-224 expression levels, and the transcription factor controling miRNA-224 expression, and confirm the role of microRNA-224 on the potential target genes- - -GSK3beta and CK1. Then we further demonstrated that microRNAs-224 involved in the molecular mechanism of liver cancer through the regulation of WNT signal pathway. The study contributes to clarify the molecular mechanisms of hepatitis-induced hepatocellular carcinoma formation, and to find specific molecular target of liver cancer treatment and prevention.

HCV感染常常诱导慢性丙型肝炎的发生，这是导致肝细胞癌形成和发展的重要因素之一。近年来的研究发现microRNA在炎症与肿瘤发生中均发挥重要的调控作用，而关于microRNA是否以及如何在丙型肝炎相关肿瘤中发挥作用尚不清晰。我们前期工作发现miRNA-224在丙型肝炎患者组织与血样中表达水平上调；miRNA-224过表达促进了肝细胞的增殖以及肝癌细胞在裸鼠中肿瘤的形成；miRNA-224抑制WNT信号负调控分子GSK3β和CK1基因3'非翻译区；miR-224启动子区有NF-KB结合位点。本研究拟进一步鉴定启动miRNA-224表达的转录因子，确证miRNA-224对靶基因―GSK3β、CK1的调控作用，进而分析miRNA-224通过调控WNT通路促进肝癌发生的分子机制。这将有助于阐明丙型肝炎诱导肝癌形成的中间环节以及调控网络，为肝癌的发生机制及寻找特异的肝癌治疗和预防的分子靶点奠定基础。

HCV感染常常诱导慢性丙型肝炎的发生，这是导致肝细胞癌形成和发展的重要因素之一。近年来的研究发现microRNA在炎症与肿瘤发生中均发挥重要的调控作用，而关于microRNA是否以及如何在丙型肝炎相关肿瘤中发挥作用尚不清晰。我们前期工作发现miRNA-224在丙型肝炎患者组织与血样中表达水平上调；miRNA-224与肝癌的发生存在潜在的联系。.基于此，我们主要开展了以下研究：1）明确HCV感染诱导miRNA-224表达上调的因素及转录机制；2）证明miRNA-224对GSK3B及CK1基因表达转录后水平的调控作用；3）进一步证实miRNA-224通过靶向GSK3B、CK1，从而促使WNT/beta-catenin的通路活化；4）证明miRNA-224通过激活WNT/beta-catenin通路，从而促进肝细胞增殖；5）最后，在细胞及动物水平综合分析miRNA-224及miRNA-155是否协同促进肝癌的发生。.在该项目的前期探索中，我们首先对miR-155的功能进行了系统的研究。结果显示HCV感染诱导了慢性炎症反应，并上调了miR-155的表达，异常高表达的miR-155能够抑制肝癌细胞凋亡并促进细胞增殖。该部分研究已经完成，论文发表于Hepatology，(Hepatology.2012,56:1631-40)。.接着，在本项目中我们考察了另一个显著上调的miRNA, miR-224, 发现其与HCV-HCC的发生密切相关，并且，miR-224潜在靶向于Wnt信号通路中的GSK-3β与CK1分子。我们证实了HCV的核酸成分（HCV-RNA）诱导了转录因子NF-kB的活化，NF-kB与miR-224的启动子区域结合从而促进了其表达；明确了miR-224直接靶向于GSK3beta、CK1的3’非翻译区（3’-UTR），从而抑制了这两个基因的表达；进一步，我们发现miR-224通过抑制GSK3beta、CK1的表达，激活了Wnt通路，促进了肝癌细胞的增殖。.同时，我们进一步深入探讨了HCV感染诱导HCC形成的其它调控环节，并在此项工作的基础上，申请并获得了另一项国家自然科学基金面上项目的支持（81472285）。两个基金的连贯性强，延续好，项目的完成为更好地解释HCV-HCC的发生发展提供帮助，并且，研究中的某些关键分子有望成为HCV-HCC早期诊断分子。