反向酵母双杂交筛选与天然免疫重要信号分子相互作用的HSV-1蛋白及其干扰天然免疫分子机制的研究

I型单纯疱疹病毒（HSV-1）是人群中极为常见的病毒，可引起口唇疱疹、角膜结膜炎、脑炎等疾病。天然免疫是机体抵抗病原体的第一道防线，而I型干扰素，特别是IFN-β的表达在抗病毒天然免疫中发挥至关重要的作用。HSV-1编码80种蛋白，可能具有多种机制逃逸宿主天然免疫的监视，然而，尚未见对其分子机制进行系统的研究。本课题拟通过构建HSV-1全部编码蛋白的酵母双杂交cDNA文库，高通量反向筛选（以宿主蛋白为诱饵筛选HSV-1文库）与天然免疫重要信号分子相互作用的HSV-1蛋白，采用免疫共沉淀、荧光共定位等实验方法进一步验证相互作用蛋白对，并采用荧光素酶报告基因检测系统结合多种分子生物学和免疫学试验方法解析所筛选到的HSV-1蛋白干扰天然免疫的机理，最终在病毒感染的细胞和动物模型水平全面阐明HSV-1逃避天然免疫的分子机制，为寻找防治HSV-1新的药物作用靶点以及开发有效的疫苗提供理论依据。

I 型单纯疱疹病毒（HSV-1）是人群中极为常见的病毒，可引起口唇疱疹、角膜结膜炎、脑炎等疾病。抗病毒天然免疫是机体抵抗病原体的第一道防线，而I 型干扰素在抗病毒天然免疫中发挥至关重要的作用。HSV-1 编码80 种蛋白，可能具有多种机制逃逸宿主天然免疫的监视，然而，尚未见对其分子机制进行系统的研究。本课题通过构建HSV-1 全部编码蛋白的酵母双杂交cDNA 文库，高通量反向筛选与天然免疫重要信号分子相互作用的HSV-1蛋白，已经筛选到几个蛋白，如ICP0，US3，UL36，US11，VP16等，采用免疫共沉淀、荧光共定位等实验方法进一步验证了它们与天然免疫信号分子的相互作用，并采用荧光素酶报告基因检测结合多种分子生物学和免疫学试验方法揭示了HSV-1 蛋白干扰和逃逸宿主抗病毒天然免疫的分子机理，为寻找防治HSV-1 新的药物作用靶点以及开发有效的疫苗提供理论依据。