蠕形螨在睑板腺功能障碍发病中的致病机制研究

Meibomian gland dysfunction (MGD) is one of the most common diseases in ophthalmology department, which usually shows the terminal catheter obstruction and/or abnormal quality and/or quantity of glandular secretions, and subsequently induce dry eye and posterior blepharitis. The cause of MGD is unclear but it has been shown by recent study that the demodex infestation is closely involved in the pathogenesis of MGD. In our preliminary studies, we have successfully cultured immortalized human meibomian gland epithelial cells (IHMGECs), and used the proliferation and differentiation conditions to imitate the environment in vivo; we also found that IHMGECs can be induced to express and synthesis pro-inflammatory factors (e.g. IL-1β). We also found the demodex can induce abnormal expression of interlukin on the ocular surface. We hypothesize that the xenogenic protein of demodex and the exotoxins and the lipase produced by demodex-carried staphylococcus aureus play an important role in the development of MGD. These factors can induce cell apoptosis, production and release of pro-inflammatory factors in meibomian gland and degeneration of meibomian gland secretion (i.e. meibum).In this study, we will extract the protein from demodex and the exotoxins and the lipase from demodex-carried staphylococcus aureus, and investigate the effects of these factors on IHMGECs. We will also observe the changes in meibomian gland and meibum samples of demodex infected patients.

睑板腺功能障碍（MGD）通常表现为终末导管的阻塞及腺体分泌物的质和/或量发生改变 ，并继而诱发干眼及后睑缘炎。MGD病因尚不明确，近期研究发现，蠕形螨感染和MGD的发生有密切关系。在前期实验中，我们成功培养了永生化的人睑板腺上皮细胞系（IHMGECs），且利用不同培养条件模拟体内睑板腺上皮细胞增殖、分化和终末阶段的生理状态，并发现IHMGECs在诱导下表达大量的促炎因子(如IL-1β)，且蠕形螨可导致眼表炎性因子异常。我们推测蠕形螨虫体蛋白及其所携带的金黄色葡萄球菌产生的外毒素和脂肪酶，可能是导致睑板腺上皮细胞结构和功能损害的重要原因。在本项目中，我们拟结合基础与临床研究，提取蠕形螨全蛋白及其携带的金黄色葡萄球菌的外毒素和脂肪酶，观察这些致病因子对IHMGECs的细胞活性、功能及合成炎症因子的影响；同时筛选蠕形螨感染阳性的患者，分析其睑脂的成分的变化，以期阐明蠕形螨在MGD 发病中的机制。

睑板腺是位于眼睑部的一种特殊类型的皮脂腺，它在维持眼表健康和稳定中起了至关重要的作用。睑板腺功能障碍（MGD）是一种慢性，弥漫性的睑板腺功能异常，通常表现为终末导管的阻塞和/或腺体分泌物的质和/或量发生改变 ，继而诱发干眼及后睑缘炎。蠕形螨是人体最常见的体表寄生虫，可将携带的细菌带入无菌的睑板腺腺腔内，所携带的细菌以金黄色葡萄球菌为主，细菌所分泌物可能直接改变睑脂中中性脂质和极性脂质的成分和比例，导致睑脂的相变温度提高，粘滞度增强，从而导致导管堵塞，引发MGD，而其中机制尚不明确。本课题组采用体外分离得到C57小鼠睑板腺上皮细胞及睑板腺组织块。研究显示体外培养72h，小鼠睑板腺组织块活性、形态与新鲜组织无差异。在炎症因子IL-1β促进睑板腺组织块导管的角化；阿奇霉素和血清促进睑板腺组织块脂质的合成。证明了IL-1β干预睑板腺导管角质化。这种新型的体外培养模式可用于研究MGD的机制。在此模型下，金黄色葡萄球菌外毒素诱导睑板腺组织块腺泡细胞和导管细胞的凋亡、角化、脂质合成减少及炎症因子的表达；金黄色葡萄球菌脂肪酶诱导睑板腺组织块腺泡细胞和导管细胞的凋亡；临床研究显示：蠕形螨促进导管开口角化、纤维化、破坏腺泡结构。在IPL的治疗下，蠕形螨数量减少，腺泡开口增大，腺泡数量增加等。脂质组学分析显示，与蠕形螨阴性正常组相比，蠕形螨阳性正常组的磷脂酰胆碱(PC)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)水平较低，磷脂酰乙醇胺(PE)水平较高。蠕形螨阳性MGD组间最显著的差异是25种OAHFA的增加，另外还伴随磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰胆碱(PC）增加，三酰基甘油(TG)、胆固醇酯（CE）减少.本课题通过小鼠睑板腺体外培养模型，探讨了金黄色葡萄球菌通过诱导睑板腺组织块导管细胞腺泡细胞的凋亡、抑制脂质的合成、促进导管和腺泡的角化、促进炎症因子的释放导致睑板腺结构和功能损害。临床研究显示蠕形螨破环睑板腺的显微结构及改变脂质的成分。研究成果可为MGD 发病中的机制提供一定的理论支持...