Nkx2.2蛋白细胞核质转运的分子机理

同源异型结构域蛋白（homeodomain）Nkx2.2是调控器官发育的重要转录因子。真核细胞中，生物大分子的细胞核质定位受到精细的调控，对调控信号传导，基因转录和细胞周期等生理功能至关重要。蛋白质在细胞内定位受核定位信号与出核信号调节，需要核质转运受体参与。我在前期研究中发现Nkx2.2蛋白定位在细胞核中，它的同源异型结构域存在核定位信号，它可以结合核质转运受体 importin 13。同时发现在异核体细胞融合试验中，Nkx2.2蛋白具有出核现象，说明其可能存在有出核信号。基于以上数据，我将在本项目中研究Nkx2.2蛋白的核定位信号的关键性氨基酸组成，Nkx2.2蛋白的出核信号及其核质转运受体，以期系统的了解Nkx2.2蛋白在细胞内定位的分子机理。

同源异型蛋白Nkx2.2是发育过程中重要的转录调节因子，参与调控胚胎脑与胰腺的形成过程。已知Nkx2.2蛋白存在核定位信号（Nuclear import signal）指导其在细胞核内的定位，但对其入核转运的分子机理仍不清楚。本研究发现之前报道的核定位信号可以介导EGFP-β-gal蛋白入核，且该过程受impα/β途径特异性抑制剂 Bimax2抑制。但其不影响Nkx2.2蛋白的入核转运。我们发现Nkx2.2蛋白的同源异型结构域具有非经典类型的入核信号的活性。同时，利用GST pull down及Co-IP实验证明在体内或体外，Nkx2.2都可以被impβ1、imp4及imp 13蛋白识别，其中impβ1的结合活性最强。在重组的入核转运实验系统中，impβ1可以转运Nkx2.2蛋白入核，说明Nkx2.2蛋白存在多个入核转运途径。