Notch信号通路在间充质干细胞异基因脑内移植诱导免疫耐受暨影响小胶质细胞免疫识别中的作用机制研究

间充质干细胞（MSCs）脑内移植治疗神经系统损伤是非常具有临床应用前景的治疗方法，异基因来源的MSCs常常是最终选择，而中枢神经系统并非一个免疫豁免区，MSCs异基因脑内移植后与脑内固主要的抗原识别细胞－小胶质细胞的相互作用情况及机制尚不清楚。申请者所在课题组在MSCs免疫原性和免疫调节方面进行了系统研究，发现MSCs可通过Notch通路配体分子影响DC细胞功能来诱导免疫耐受；申请者前期的初步研究发现MSCs异基因脑内移植后可以诱导免疫耐受而长时间存活，体外试验发现MSCs可影响小胶质细胞的形态、增殖、吞噬等功能，在此基础上本课题拟通过体外及体内试验深入探索MSCs对小胶质细胞增殖、吞噬、迁移能力，以及抗原提呈相关功能分子和炎症介质表达的影响；并在前期研究基础上通过mRNA干扰、Allo-DTH等方法探讨Noth通路相关配体分子（主要是Jagged配体家族）在其中的作用机制。

本课题组得到国家自然科学基金委的资助后即按照计划申请书中的研究内容和研究计划展开本课题的研究工作。 研究过程中遇到一些困难和难题，经过努力得以克服，目前已圆满完成课题计划书内容，发现并提出了需要进一步探索研究的问题。.本研究首先建立和完善了小鼠骨髓间充质干细胞和小胶质细胞的分离和培养体系；通过一系列体外实验发现间充质干细胞与小胶质细胞共培养后可显著抑制炎症刺激因子引起的小胶质细胞活化，主要表现为炎症因子（白介素1 和肿瘤坏死因子）表达减低，细胞形态活化及迁移、吞噬功能减弱，过氧化物产生减低。进一步体外研究中利用抗体封闭间充质干细胞表面的Jagged－1配体后，间充质干细胞抑制小胶质细胞活性的能力显著减低；利用RNA干扰的方法，干扰间充质干细胞Jagged－1配体的表达后，同样发现间充质干细胞的免疫调节作用显著减低。体外的实验研究证实间充质干细胞可以显著抑制小胶质细胞的激活和免疫识别功能，其中Notch信号通路中的Jagged－1配体通路发挥了重要作用。.动物实验发现通过RNA干扰沉默表达Jagged－1配体的间充质干细胞异基因脑内移植后不能存活，而未行处理的间充质干细胞脑内移植后可以存活，进一步佐证了jagged－1配体通路在间充干细胞异基因脑内移植诱导免疫耐受的机制中发挥了重要作用