miR-520b在芹菜素逆转肝癌阿霉素耐药中的作用及其分子机制研究

Chemoresistance is a major obstacle contributing to the failure of cancer therapy in hepatocellular carcinoma (HCC). Regulation of autophagy by the specific microRNAs opens up a new way for reversal of chemoresistance in cancer. Our preliminary data found that apigenin (APG) can reverse doxorubicin (ADM)-resistance in BEL-7402/ADM cells, and reversal of ADM-resistance by APG is associated with up-regulation of miR-520b. miRNA target prediction using bioinfonnatics software revealed that ATG7 is one of the possible target gene of miR-520b. Moreover, expression of ATG7 protein could be regulated negatively by miR-520b. Therefore, we hypothesized that APG could reverse ADM-resistance via up-regulating miR-520b targeting ATG7-mediated autophagy in BEL-7402/ADM cells. On the basis of precedent research, this study will confirm and clarify a new molecular mechanism for the reversal effects of APG on ADM-resistance in HCC, and lay a theoretical and experimental basis for the clinical application of APG as an effective chemoresistance reversal agent.

化疗耐药是临床肝癌治疗面临的一个主要障碍和亟待解决的难题。特异性的microRNAs对肿瘤细胞自噬的调控为耐药的逆转开辟了新途径。我们的前期工作发现，芹菜素(APG)可逆转肝癌多药耐药细胞对阿霉素(ADM)的耐药性，且miR-520b的上调与APG逆转肝癌ADM耐药密切相关。生物信息学软件分析发现，miR-520b可能靶向调控自噬相关基因7(ATG7)。进一步的实验结果显示，miR-520b反向调控ATG7蛋白的表达，提示ATG7可能是miR-520b的靶基因。基于此，我们推测APG通过上调miR-520b，进而靶向抑制ATG7介导的自噬，最终逆转肝癌ADM耐药。因此，本研究拟在前期工作的基础上，系统证实和阐明APG逆转肝癌ADM耐药的分子机制，为将来APG作为化疗耐药逆转剂的临床应用奠定理论基础和实验依据。

化疗耐药是临床肝癌治疗面临的一个主要障碍和亟待解决的难题。特异性的microRNAs对肿瘤细胞自噬的调控为耐药的逆转开辟了新途径。黄酮类化合物芹菜素（apigenin, APG）对多种恶性肿瘤均有抗肿瘤作用。我们的研究拟在前期工作的基础上，系统证实和阐明miR-520b在APG逆转肝癌阿霉素（doxorubicin, ADM）耐药中的作用及分子机制。我们发现，在人肝癌多药耐药细胞系BEL-7402/ADM中，APG能明显增加ADM的敏感性，诱导miR-520b表达，抑制ATG7介导的自噬。我们还发现miR-520b mimics亦能明显增加ADM的敏感性，抑制ATG7介导的自噬。同时研究发现，ATG7是miR-520b潜在的靶基因。在BEL-7402/ADM裸鼠皮下移植瘤模型中，APG通过上调miR-520b表达和下调ATG7表达有效地抑制肝癌移植瘤生长。结果表明，APG可通过miR-520b/ATG7信号通路，增强BEL-7402/ADM对ADM的敏感性，进而逆转肝瘤耐药，为APG作为化疗增敏剂的临床应用提供了实验依据。