长期给予皮质酮模拟应激所致睡眠障碍的蓝斑核糖皮质激素受体调节机制

Sleep disorders is a kind of common disease. It severely influences people's normal life and work. The clinical drugs used in the treatment of sleep disorders are mostly targeted on the γ amino butyric acid A receptor, which inevitably cause tolerance, dependence and addiction. Therefore, searching an original type of hypnotic which acted on the non-GABA(A) pathway, become one of the new method. In the previous work, we found that seven days subcutaneous injection of 40mg/kg corticosterone can mimic stress-induced sleep disorders. Immunohistochemical study showed that c-Fos expressions were increased in locus coerulus (LC) noradrenergic neurons. These results suggested that LC may be related to the corticosterone induced insomnia.In addition, microinjection of the GR antagonist RU486 into LC can reverse the corticosterone's action. It is well known that glucocorticoid receptor (GR) is abundantly expressed in LC, but the role of GR in LC about sleep regulation is unclear. This project is designed to investigate the role of GR signal transduction pathway in LC in the corticosterone inducedsleep disorder. It could be looking forward to provide scientific basis and experimental evidence for finding new ways to treat sleep disorders.

睡眠障碍是一种常见疾病。目前临床用于治疗睡眠障碍的药物，大多作用于γ氨基丁酸A（GABAA）受体，从而不可避免地会产生耐受、依赖和成瘾等问题。因此，探索和寻找作用于非GABAA受体通路的催眠药，就成为了催眠药物研发中的新途径之一。我们在前期研究中发现，连续7天皮下注射40mg/kg的皮质酮，可模拟应激所致睡眠障碍，使大鼠觉醒增加，睡眠减少。免疫组化结果显示，蓝斑核（LC）的NE能神经元c-Fos表达上升，提示LC可能与皮质酮所引起的睡眠障碍相关。另外，LC核内定位注射糖皮质激素受体（GR）拮抗剂RU486可以逆转皮质酮所致睡眠障碍。LC中有较丰富的糖皮质激素受体（GR）表达，但其调控睡眠的机制尚不清楚。本项目拟以皮质酮诱导的睡眠障碍为模型，研究LC中GR参与睡眠与睡眠障碍调控机制，为发现新的治疗睡眠障碍的途径和方法，提供科学依据和基础实验证据。

反复应激所致的糖皮质激素持续升高可引起许多严重的生理和心理疾病，如抑郁、焦虑以及睡眠障碍。其中，睡眠障碍主要表现为睡眠质量下降、睡眠持续时间减少和睡眠结构异常等改变。本课题旨在建立糖皮质激素水平持续升高所致的睡眠障碍模型并探究其可能机制；并通过相关性分析探讨各个睡眠参数与抑郁样行为参数之间的相关关系。.研究发现，蓝斑核中糖皮质激素受体在重复给予皮质酮所致的睡眠障碍中起重要作用。皮质酮（40 mg/kg, s.c.）连续7天给药之后显著减少LC中GR的表达，包括总蛋白以及胞浆胞核内的蛋白；同时减少LC中GR的mRNA含量。在LC中给予糖皮质激素受体拮抗剂RU486可以逆转皮质酮引起的睡眠障碍，包括总睡眠时间、快眼动睡眠时间以及睡眠时相百分比的恢复。同时，还可以逆转单独给予皮质酮引起的LC内GR受体含量减少。以上实验结果表明，LC内GR在连续7天给予皮质酮引起的睡眠障碍中起到非常重要的作用。.进一步的研究表明，连续7天给予皮质酮显著增加了LC中酪氨酸羟化酶(TH)蛋白的表达，并且增加了VLPO、LC、下丘脑中去甲肾上腺素(NE)的含量。以上实验结果表明，皮质酮与LC内GR结合之后进入核内，引起TH表达的上调，最终引起脑内相关脑区NE的含量增加。.相关性研究发现，睡眠参数与抑郁行为之间有显著的相关性：1)强迫游泳中不动时间百分比与REM睡眠潜伏期和深睡眠百分比呈负相关；同时与Delta波段的能谱呈负相关、与Beta波段的能谱呈正相关；此外，还与REM睡眠发生次数呈正相关、与深睡眠发生次数呈负相关。2)糖水偏爱百分比与总睡眠时间百分比呈正相关，与REM睡眠时间百分比呈负相关；此外还与睡眠的发生次数(即浅睡眠的发生次数)呈正相关。.本课题通过给予皮质酮的睡眠障碍模型首次发现了糖皮质激素受体在睡眠障碍形成过程中的重要作用，为临床上寻找治疗睡眠障碍的新靶点提供了理论依据。此外，还通过相关性研究揭示了睡眠与不同抑郁行为参数之间的相关性，为进一步阐明睡眠障碍与抑郁的关系提供了理论依据。