基于系统生物学的中药调节膜性肾病补体系统活化的研究

Development of Membranous Nephropathy (MN) is a complex process, involving multiple targets and factors. Classic treatment methods, such as non-specific immunotherapy, are often characterized by poor efficacy and significant side effects. Chinese medicine treatment may regulate immune function and improve renal function, but the underline mechanism is unclear. We intend to adopt an animal model of MN, Proteomic and metabolomic analysis of renal tissue, blood and urine changes before and after treatment of Traditional Chinese Medicine (TCM). Quantitative changes in tissue protein by TCM, and the correlation of blood or urine proteomics and metabolomics. Through systematic analysis, identify the drug targets of TCM treatment and the biomarkers to evaluate the therapeutic effect of MN. Further validated in the crowd, to provide solutions for the clinical evaluation of TCM treatment, reveal related-mechanism and provide the molecular basis for optimizing treatment of MN.

膜性肾病的发生发展是一个复杂过程，涉及到多靶点和多因素。经典的治疗方法如免疫治疗时非特异性的，往往疗效不佳且副作用较大。中药治疗可调节病人的免疫功能，改善肾功能，但其作用机制尚不明了。 我们拟采用膜性肾病动物模型，比较中药治疗前后的肾组织蛋白质组，血液蛋白质组和代谢组以及尿液蛋白质组和代谢组变化，发现中药治疗改变的组织蛋白质定量变化，以及与血液/尿液蛋白质组和代谢组变化的相关性。通过系统分析，发现中药治疗膜性肾病的药物靶点和评价治疗效果的生物标记物，进一步在人群中进行验证，为临床中药治疗膜性肾病提供评价方案，揭示膜性肾病治疗相关的作用机制，为优化治疗方案提供分子基础。

背景目的：观察健脾消肿颗粒对PHN大鼠的疗效，探讨健脾消肿颗粒对足细胞以及足细胞相关功能蛋白的影响，以及探索健脾消肿颗粒治疗膜性肾病的药物靶点以及评价疗效的生物标记物。内容方法：选取健康雄性SPF级Wistar大鼠，适应性喂养后随机抽取正常对照组后，进行造模，正常对照组腹腔一次性注射生理盐水1ml/100g，造模组腹腔一次性注射等量羊抗Fx1A抗血清。造模成功后区组随机，分为模型组、健脾消肿颗粒组。分别检测各临床指标，并应用病理染色方法免疫组化等方法观察大鼠病理改变以及足细胞损伤情况；用PCR技术测定足细胞功能蛋白的表达，运用系统生物学的方法探索健脾消肿颗粒治疗膜性肾病的药物靶点。结果：（1）健脾消肿颗粒疗效确切，可以降低PHN大鼠模型24h尿蛋白，升高血浆白蛋白；（2）健脾消肿颗粒可以改善PHN大鼠病理损伤，保护足细胞并促进其修复；（3）足细胞相关蛋白nephrin、podocin等蛋白出现过表达可能仍提示足细胞损伤，蛋白表达上调或下调可能与足细胞损伤严重程度以及病情严重程度相关。（4）明确了海曼肾炎补体激活的机制；揭示健脾消肿颗粒的疗效作用机制之一是抑制补体系统的活化；（5）揭示健脾消肿颗粒可以改善PHN大鼠的氧化应激病理状态；结合本实验结果提示补体H因子，C1抑制物，C1q结合蛋白可能是健脾消肿颗粒抑制补体激活的作用生物标记物。Plectin、SM22α可能是膜性肾病肾小球壁层上皮细胞向足细胞转分化的分子标记物。