TV-miR-200b/c靶向抑制HER2/HER3克服乳腺癌对赫赛汀耐药

Our previous data demenstrated that miR-200b was down-regulated in gastric cancer, glioma and breast cancer tiussues and cells. Overexpression of miR-200b inhibited tumor cells proliferation and invasion (Tang, et al. Cancer Lett; J Transl Med; Med Oncol). MiR-200b/c reduced the levels of global DNA methylation (GDM) by targeting DNA methyltransferases（Tang, et al. Clin Cancer Res）. We further found that miR-200b combining with miR-200c inhibited HER2+ breast cancer cells selectively and re-sensitized herceptin-resistant cells to herceptin. Self-created TV-miR-200b/c could induce apoptosis of HER2+ breast cancer cells and inhibit the protein expression of HER2 and HER3. In this project, we will confirm the effects of TV-miR-200b/c on regulating HER2/HER3 expression and carcinogenesis of HER2+ breast cancer. In addition, the role that TV-miR-200b/c possesses therapeutic potential to overcome herceptin resistance will be elucidated. In conclusion, this project will provide experimental evidences for developing TV-miR-200b/c as a novel therapeutic strategie in HER2+ breast cancer treatment.

申请者前期证实miR-200b在胃癌、胶质瘤及乳腺癌组织和细胞中表达下调，过表达miR-200b可抑制肿瘤细胞生长侵袭（Tang,et al. Cancer Lett; J Transl Med; Med Oncol），miR-200b/c可靶向DNA甲基化转移酶调控全基因组甲基化水平（Tang, et al. Clin Cancer Res），联合miR-200b和miR-200c能选择性抑制HER2阳性乳腺癌生长，增加赫赛汀耐药的乳腺癌细胞的敏感性。自主发明的TV-miR-200b/c能诱导HER2阳性乳腺癌细胞凋亡并抑制HER2、HER3表达。本项目通过DNA甲基化转移酶等探讨TV-miR-200b/c调控HER2/HER3诱导乳腺癌的分子机制及TV-miR-200b/c克服赫赛汀耐药的作用，为TV-miR-200b/c作为一种新的HER2/HER3的靶向药物提供实验依据。

乳腺癌是女性第一大恶性肿瘤。赫赛汀耐药是HER2过表达型乳腺癌治疗的主要障碍，乳腺癌干细胞是一群具有自我更新，无限增殖和多向分化能力的细胞。miR-200c与干细胞的多种功能密切相关，包括肿瘤复发，转移和耐药。我们推测miR-200c可能有助于抑制或逆转HER2过表达型乳腺癌的赫赛汀耐药。在本研究中，我们分别采用HER2+的乳腺癌细胞SKBR3和HER2- 的乳腺癌细胞MCF-7，通过流式分选筛选出其CD44+CD24-表型的细胞系干细胞SKBR3-S和MCF-7-S，用以评估miR-200c在BCSCs干性维持和赫赛汀耐药中的所发挥的作用。我们的研究结果表明，miR-200c在乳腺癌细胞系及CD44+CD24-表型的乳腺癌细胞系BCSCs中均低表达，miR-200c过表达可显著抑制SKBR3细胞的干细胞球囊形成能力并减少CD44+CD24-表型的细胞数目，经不同浓度的赫赛汀处理，SKBR3-S和SKBR3细胞中miR-200c表达水平随之增加，且联合miR-200c和赫赛汀处理时，SKBR3-S和SKBR3细胞的增殖能力显著降低，凋亡能力显著增加，但MCF-7细胞中均无此现象。miR-200c过表达还可降低其下游靶基因，包括Jagged1，ZEB1和Bmi1的表达，而这三个基因正是调控干细胞CD44+CD24-表型和耐药的关键基另外，miR-200c过表达可显著抑制SKBR3-S和SKBR3细胞在裸鼠体内的成瘤能力及恶性进展，而对MCF-7-S和MCF-7细胞则无此作用。综上，miR-200c在HER2阳性乳腺癌干细胞的干性维持和增加对赫赛汀的药物敏感性中发挥重要作用。并且研究提示TV-miR-200b/c能诱导HER2阳性乳腺癌细胞凋亡并抑制HER2、HER3表达，证实TV-miR-200b/c具有克服赫赛汀耐药的作用，为TV-miR-200b/c作为一种新的HER2/HER3的靶向药物提供了坚实的理论基础和实验依据。