非对称小RNA干扰技术靶向沉默USP22基因对膀胱癌生物学行为的调控

寻求调控膀胱癌生物学特性的有效靶点是国际倍受关注的研究焦点。USP22是一种新近发现识别组蛋白H2A、H2B特异性单泛素位点的泛素水解酶，参与肿瘤发生、发展过程中癌基因(c-myc)对其下游基因转录的调控，是肿瘤复发、转移和化疗耐药的癌致死标签。本课题组在已证实USP22在膀胱癌中高表达的工作基础上，进一步提出并验证USP22具有上调癌基因HOX、H-RAS，下调抑癌基因P63、PUMA的崭新假说。此外，运用新型非对称小RNA干扰(Asymmetric RNAi, aiRNA)技术具有高效、特异、持久的特性，结合本课题组已构建的膀胱癌组织特异性启动子UPIb技术优势，建立靶向USP22基因的膀胱癌aiRNA干扰体系，观察沉默USP22基因对膀胱癌增殖、凋亡、侵袭转移的影响。本课题的成功实施有望阐明USP22的生物学功能及作用机制，为膀胱癌的早期预防和治疗提供新的靶点和实验基础。

寻求调控膀胱癌生物学特性的有效靶点是国际倍受关注的研究焦点。USP22是一种新近发现的识别组蛋白H2A、H2B特异性单泛素位点的泛素水解酶，参与肿瘤发生、发展过程中癌基因（c-myc）对其下游基因转录的调控、是肿瘤复发、转移和化疗耐药的癌致死标签。非对称性的小干扰RNA（aiRNA）是最近发现的一种新的小干扰RNA，能够减少靶基因沉默的非特异性，提高靶基因的沉默效率，而且减少了受RNAi的“脱靶效应”和“竞争效应”的影响。因此，本课题运用新型非对称RNA干扰技术具有高效、特异、持久的优势，建立靶向USP22基因的膀胱癌aiRNA干扰体系，观察沉默USP22基因对膀胱癌生物学行为的影响的影响。本课题研究发现USP22 aiRNA能够有效沉默膀胱癌细胞中USP22基因的表达并抑制肿瘤细胞的增殖。其机制与调控膀胱癌细胞周期，上调p53、p21，下调cyclin E和Mdm2的表达有关。进一步的研究发现，通过aiRNA沉默USP22能够阻滞转录因子Sp1与Myc启动子的结合。另外，动物成瘤实验发现，USP22 aiRNA能够显著抑制膀胱肿瘤细胞的生长。本课题成功构建了具有特异性抑制膀胱肿瘤增殖的USP22 aiNRA，为膀胱癌的靶向基因治疗提供了高效的新方法。