Graves’病NK细胞功能异常的机制

Graves' disease (GD) is one of organ specific autoimmune diseases, the defect of immunosuppression plays a important role in the initial stage, there are a variety of regulatory immune cells dysfunction, the pathogenesis is not elucidated. Natural Killer (Natural Killer, NK) cells is also a kind of important immune regulator, several abnormalities of NK cell function and number in GD patients have been described in our previous study. It is remain unclear whether the NK cell disfunction is a consequence of GD.Based on our previous study, we plan to monitor NK function in GD patients in the whole course of disease, analyze the association with relevant factors, such as thyroid function, immune state or treatment. By using NK cells in vitro and hyperthyroidism animal model, find out influences of thyroid hormones and thyroid receptor antibody affecting the function of NK cell. We will reveal whether the disfunction of NK cell secondary to GD abnormal thyroid function and/or immune disorders, and realize the mechanics.

Graves'病（Graves’ disease，GD）是一种器官特异性自身免疫性疾病，免疫抑制的缺陷是其启动环节，存在多种免疫调节细胞的功能紊乱，具体发病机制尚未阐明。自然杀伤（Natural Killer，NK ）细胞也是一种重要的免疫调节细胞，我们的前期研究研究表明GD患者存在NK细胞功能和数量的异常。尚不明确NK细胞的功能异常是否继发于GD。本研究拟在前期研究的基础上，动态监测GD患者治疗过程中不同阶段NK细胞的功能，分析与病程、甲状腺功能、免疫状态及治疗方法等因素的相关性；应用体外细胞实验和非免疫甲亢动物模型，研究甲状腺激素和甲状腺自身抗体对NK细胞功能的影响；并初步探讨促甲状腺激素受体和PI3K相关信号通路在NK杀伤活性调节中的作用。以期明确GD患者的NK细胞的功能异常是否继发于GD的甲状腺功能异常和/或免疫紊乱及其机制。

Graves病（Graves ’disease, GD）患者存在NK细胞功能的异常，但是否继发于GD尚不明确。本课题对GD患者治疗前后NK细胞功能进行了检测，分析了GD患者NK细胞功能与甲状腺激素水平及治疗的相关性。应用体外细胞实验和非免疫甲亢动物模型，在体外和体内水平研究甲状腺激素和TSH对NK细胞功能的影响。验证了TSHR在人和小鼠NK细胞以及人NK-92细胞系中的表达、功能及其在NK细胞功能调节中的作用机制。主要研究结果：①与正常对照相比，GD患者NK细胞活性低，胞内IL-6和IL-10表达高，CD4+T细胞内IL-21表达低。②GD患者治疗后与未治疗相比：NK细胞活性和杀伤能力均降低；NK细胞内IL-6水平下降，IL-10水平升高；CD4+T细胞内IL-21升高。③甲状腺激素体外刺激NK92细胞仅有IL-6水平升高。TSH刺激后IFN-γ水平升高，IL-6水平下降。④甲亢小鼠与正常对照小鼠相比：NK细胞活性低，胞内IL-6高。⑤RT-PCR证实人、小鼠NK细胞以及人NK-92细胞系上有TSHR表达，且人、小鼠NK细胞以及NK-92细胞上的TSHR mRNA序列与人甲状腺、PBMC的TSHR mRNA序列相同。免疫荧光染色证实NK-92细胞胞膜上有TSHR蛋白表达。⑥牛TSH能刺激NK-92细胞产cAMP。7.PI3K抑制剂LY294002可以影响体外TSH对NK92细胞免疫活性的作用。研究结果提示：GD病患者存在NK细胞活性异常，可能与甲状腺腺激素水平升高有关，但并未随GD治疗后甲状腺激素水平恢复正常而逆转，不能排除GD患者NK细胞还存在固有缺陷或抗甲治疗后整体免疫平衡的变化带来的影响。NK细胞上也存在有功能的TSHR，TSHR和PI3K相关的信号通路可能在NK细胞功能调节中发挥作用。